Саманта Миллер, президент и главный научный сотрудник лаборатории каннабиса Pure Analytics.
С появлением диспансеров медицинского каннабиса развилось несколько других видов бизнеса и поставщиков услуг, которые помогают удовлетворять их потребности, в том числе и лаборатории, тестирующие продукцию для индустрии медицинского каннабиса. До легализации медицинского каннабиса тестирование каннабиса ограничивалось анализами, проводимыми в рамках уголовного расследования или в рамках одной из немногих исследовательских программ, таких как программа Университета Миссисипи под руководством доктора Махмуда ЭльСолхи или израильская программа доктора Рафаэля Мечулама, которые проводят санкционированные правительством исследования.
Сегодня развитие и прогресс независимых лабораторий по тестированию каннабиса в штатах с легализацией медицинского и рекреационного каннабиса представляют собой захватывающий прогресс как в стремлении получить каннабис медицинского качества, выращенный и переработанный в соответствии с установленными стандартами. Захватывающим является и создание мощного инструмента для независимых фермеров, занимающихся выращиванием каннабиса, который позволит им осуществлять стратегические селекционные программы, направленные на выделение интересующих их признаков и повышение потенции с помощью прогнозирования, используя тестирование на вегетативной стадии для помощи в отборе растений для разведения или выращивания. См. статью «Тестирование каннабиноидной потенции как инструмент для фермера и селекционера».
Доктор Мечулам читает лекцию в Еврейском университете Иерусалима
Лаборатории, специализирующиеся на аналитике каннабиса, проводят несколько типов тестов для поддержки модели медицинского диспансера, включая тестирование каннабиноидной потенции, микробиологический скрининг на плесень, грибки и бактерии, а также тестирование на пестициды, которое ищет остатки вредных химических веществ, которые могли быть применены во время цикла роста. По мере распространения услуг по тестированию и легализации каннабиса, а также быстрого развития и изменения рынка продуктов, менялись и предложения лабораторий каннабиса. Многие лаборатории теперь предлагают тестирование на наличие вкусовых и ароматических соединений (известных как терпены), содержащихся в каннабисе. Тяготение к химическим концентратам, известным как воск, шэттер, дабс и прочее, также привело к спросу на специфические услуги, такие как тестирование остаточного растворителя и тестирование на токсичные примеси, содержащиеся в низкосортном газе бутане, пропане и CO2, часто используемом для производства воска. В регионах, где регулирование находится в центре внимания, ты также найдешь требования, установленные штатом, например в Неваде, где требуется тестирование на содержание тяжелых металлов и остаточных удобрений и питательных веществ.
Диспансер медицинской конопли, Florin Wellness Center (FWC), ведет оживленный бизнес на этой фотографии, сделанной Полом Клемонсом.
Первая лаборатория по производству каннабиса в США открылась в Колорадо. За ней быстро последовали многие другие, большинство — в Калифорнии, где на растущем рынке диспансеров практически в одночасье появились сотни заведений в пределах одного города. Самый распространенный вид анализов, проводимых лабораториями каннабиса, — это анализ на потенцию каннабиноидов. Тесты на потенцию дают пациентам, употребляющим медицинский каннабис, важную информацию об активных соединениях в каннабисе. Это может помочь им выбрать подходящий каннабис в зависимости от конкретного заболевания, подсказав, какие активные соединения в нем присутствуют и их относительное количество. Обычно тестируются такие каннабиноиды, как THC, THCA, CBD, CBDA, CBN, CBC и CBG, а скоро будут и THCV и CBDV, благодаря усилиям компаний-производителей химикатов, поддерживающих специфические потребности индустрии тестирования каннабиса.
Американские лаборатории каннабиса ограничены в том, какие каннабиноиды они могут законно включать в свои анализы, в зависимости от того, какие каннабиноиды доступны для покупки в качестве сертифицированных эталонных стандартов у компаний, производящих химические стандарты в США. На момент выхода этой книги эталонные стандарты каннабиноидов, доступные в США для использования аналитиками, включают: THC, THCA, CBD, CBDA, CBG, CBN, CBDV и CBC. Эти эталонные стандарты представляют собой очищенные каннабиноиды в растворе и используются для калибровки оборудования, применяемого для измерения потенции. Именно эти сертифицированные эталонные растворы позволяют химику идентифицировать и количественно определить каннабиноиды, присутствующие в экстракте. Если оборудование правильно откалибровано с использованием сертифицированных эталонных стандартов, две разные лаборатории должны быть в состоянии измерить один и тот же экстракт каннабиса и получить схожий результат. Некоторые лаборатории каннабиса предпочитают составлять отчеты о каннабиноидах на основе теоретических данных, а не проверять идентичность и количество на основе использования сертифицированного химического эталонного стандарта. Такая практика может быть приемлемой в исследовательской среде, но она неприемлема в среде, ориентированной на пациента, где поставщики услуг должны работать по тем же стандартам, «как если бы» их регулировало федеральное правительство, а их анализы были бы «сертифицированы» Однако на переполненном и высококонкурентном рынке поставщиков услуг многие «дотянутся» до того, чтобы заявить, что они могут предоставлять услуги или проводить анализ на определенные соединения, такие как экзотические и редкие каннабиноиды, которые другие не могут, в попытке развить конкурентное преимущество на рынке тестирования каннабиса. Если никто больше не проводит анализ на определенное соединение, то, скорее всего, на это есть причина, и легитимность анализа может быть поставлена под сомнение. Это приводит нас к тому, что важно выбрать поставщика услуг, который сможет предоставить надежные и точные результаты.
Различные концентраты каннабиса (слева направо): воск, шэттер, бабл-хэш и прессованный киф (гашиш).
Выбор лаборатории для исследования каннабиса
Когда диспансеры, пациенты и фермеры начинают выбирать подходящего им поставщика услуг, это может быстро превратиться в продирание через путаницу мнений, маркетинговых заявлений и вариантов. Имея под рукой факты о процессах тестирования и оборудовании, соответствующих твоим собственным потребностям, ты сможешь выбрать лучшего поставщика услуг для своих нужд.
Тестирование каннабиноидов на потенцию было самым противоречивым в период становления индустрии независимых лабораторий по тестированию каннабиса в США. Это привело к тому, что различные группы, стремящиеся либо узаконить процесс тестирования, либо выявить недостатки в практике поставщиков услуг по тестированию каннабиса, проводили множество слепых тестов поставщиков услуг в пределах одного региона. Один из таких «кольцевых тестов», опубликованный в журнале О’Шонесси о медицинском каннабисе в 2011 году, был проведен калифорнийским NORML и включал в себя лаборатории, предлагающие услуги по тестированию каннабиса в штате Калифорния на тот момент. Результаты, полученные в 10 лабораториях, оказались весьма показательными и подтвердили тот факт, что для того, чтобы результаты лабораторий совпадали, необходимо использовать сертифицированные эталонные материалы. Оказалось, что те лаборатории, которые «делали свои собственные» химические эталоны, а не покупали сертифицированные, имели результаты, значительно отличающиеся от остальных, в то время как в нескольких лабораториях наблюдалось хорошее согласие. Тест выявил несколько основных принципов, которыми можно руководствоваться при оценке лаборатории по производству конопли.
Понимание процессов тестирования и оборудования может помочь тебе сориентироваться в выборе поставщиков услуг и вариантов тестирования, наиболее подходящих для твоих нужд. Разные поставщики услуг специализируются на разных типах образцов и предлагают разные варианты анализа. В нерегулируемой среде тестирования каннабиса на момент написания этой статьи не существует определенного способа проведения того или иного типа анализа. Это приводит к тому, что используется множество различных методов, что запутывает пациента и фермера в интерпретации и понимании того, как сравнивать результаты разных поставщиков услуг. Знание нескольких ключевых моментов поможет направить тебя в правильном направлении.
В этом урожае шишек ‘Bubba Kush’ содержание ТГК составляло от 13 до 19 процентов. Образцы были взяты на разных частях растений.
СРАВНЕНИЕ GC И HPLC ИЛИ UPLC
Газовая хроматография | Высокоэффективная жидкостная хроматография или сверхвысокоэффективная хроматография |
Поток газа низкого давления помогает перемещать соединения к детектору | Поток растворителя под высоким давлением помогает перемещать соединения к детектору |
Детектор разрушает соединения | Детектор обычно не разрушает соединения |
Не может обнаружить каннабиноидные кислоты | Можно обнаружить каннабиноидные кислоты |
Анализ НЕ приводит к образованию значительных опасных отходов. Экологически чистый | При анализе образуется много опасных отходов в виде растворителей |
Процесс тестирования потенции
Основными этапами процесса тестирования потенции, которые влияют на точность и достоверность результатов, являются:
- отбор проб
- калибровка оборудования
- качество используемых химических эталонов
- опыт и квалификация человека, выполняющего работу
Отбор проб может проводиться на нескольких этапах движения каннабиса от фермера к пациенту. Сначала продукт может быть отобран на ферме и передан в диспансер, который затем возьмет образец для передачи в лабораторию, где каннабис будет окончательно отобран самой лабораторией. Каждый шаг на этом пути — а также обращение с образцом — может повлиять на конечные результаты определения потенции и наличие каннабиноидов, таких как CBN (продукт распада). На каждом этапе обработки и отбора пробы образец каннабиса должен быть репрезентативным по отношению ко всему количеству материала, из которого он отобран. Для фермера, имеющего несколько фунтов одного и того же сорта каннабиса, взять репрезентативный образец означает сделать отбор шишек разного размера с разных растений и разных частей растения. Рекомендуемый размер образца для сдачи в лабораторию — от 0,25 до 1 грамма (0,008-0,035 унции) на фунт материала.
В лаборатории образец нужно разрезать или измельчить, чтобы сделать его гомогенизированным или однородным. Часть этого гомогенизированного образца взвешивают на очень чувствительных весах, а затем экстрагируют растворителями, такими как метанол или изопропиловый спирт, для анализа. Весы, используемые для взвешивания образцов, необходимо регулярно калибровать, а также вести датированный журнал этих калибровок. В некоторых лабораториях образцы перед взвешиванием для анализа высушивают до нулевого содержания влаги. В зависимости от того, сколько влаги было в растительном материале изначально, это может сильно повлиять на результаты — от 3 до 10 процентов по весу. Экстракция образца включает в себя помещение отмеренного количества растворителя в пробирку со взвешенным образцом конопли. В разных лабораториях для экстракции используются разные растворители. Не каждый растворитель хорошо справляется с задачей полного извлечения всех каннабиноидов. Метанол, этанол и изопропанол — лучшие варианты для полной (также известной как исчерпывающей) экстракции, тогда как ацетон и гексан, используемые некоторыми поставщиками услуг, не так полно извлекают ТГК и КБД. Такая неполная экстракция приведет к общему снижению результатов потенции. После добавления растворителя процесс экстракции может варьироваться. Одни могут нагревать образец для экстракции, другие — сонировать, используя ультразвуковые волны, или помещать в шейкерную ванну или стол. Использование ультразвуковой водяной бани, как правило, является лучшим методом для полной экстракции каннабиноидов. (Найди исследование, посвященное этим вопросам экстракции растворителями, на сайте https://www.restek.com/row).
В зависимости от типа анализируемого образца один способ анализа может быть более подходящим, чем другой. Большинство тестов на потенцию и пестициды в образцах конопли подразумевают анализ образца с помощью хроматографического оборудования того или иного типа. Два распространенных типа — газовая хроматография (GC) и высокоэффективная или сверхвысокоэффективная жидкостная хроматография (HPLC или UPLC). Эти приборы могут быть оснащены различными типами детекторов. Некоторые поставщики услуг заявляют о своем превосходстве, основываясь на выбранном ими оборудовании. Оба типа приборов дают точные и жизнеспособные результаты, если они правильно откалиброваны и используются опытным оператором, который может интерпретировать и подтвердить полученные данные.
Газовая хроматография (GC)
Газовый хроматограф — это тип аналитического оборудования, в котором поток сжатого газа низкого давления — чаще всего водорода или гелия — проталкивает образец от инжектора к детектору прибора через небольшую трубку, называемую колонкой. Колонка в газовом хроматографе — это трубка из плавленого кварца длиной от 15 до 30 метров, покрытая изнутри различными веществами. Эти покрытия и длина трубки заставляют соединения отделяться друг от друга в пространстве и времени, пока они проходят через колонку. Таким образом, образцы достигают детектора по отдельности и могут быть измерены по отдельности. Если анализ проводится неправильно или слишком быстро, два соединения могут попасть в детектор одновременно и быть измерены как одно соединение, что приведет к ошибочному результату.
Газовые хроматографы могут быть оснащены несколькими типами детекторов. Наиболее распространенные типы детекторов для тестирования потенции каннабиса включают FID (пламенно-ионизационный детектор), MS (масс-спектрометры) и TCD (детектор теплопроводности). FID и MS-детекторы — лучший выбор для надежного анализа каннабиноидов методом ГХ. Анализ пестицидов может включать такие детекторы, как ECD (детектор электронного захвата), NPD (азотно-фосфорный детектор) или PFPD (импульсный пламенно-фотометрический детектор).
В случае всех типов детекторов ГХ экстракт образца, который вводится в прибор, часто нагревается до температуры от 302ºF до 392ºF (150°C-200°C). Для того чтобы испарить образец, чтобы его можно было перенести из инжектора в колонку потоком газа, образец также сжигается, когда он попадает в детектор FID. Это испарение образца декарбоксилирует или активирует любые кислые каннабиноиды, как если бы они были сожжены или испарены. В масс-спектрометрическом детекторе образец ионизируется и фрагментируется, чтобы идентифицировать присутствующие соединения. Испарение образца делает газовую хроматографию лучшим вариантом для анализа образцов каннабиса, предназначенных для вдыхания путем сжигания или испарения. С аналитической точки зрения такое прямое измерение каннабиноидов в их декарбоксилированном состоянии лучше всего имитирует ощущения пациента при вдыхании.
Путь пробы в газовом хроматографе
Автоматический пробоотборник газового хроматографа
Высокоэффективный жидкостный хроматограф. (Ультравысокоэффективные жидкостные хромато-графы имеют такой же внешний вид)
Высокопроизводительная и сверхвысокопроизводительная жидкостная хроматография (ВЭЖХ и УПЖХ)
Высокопроизводительную и сверхвысокопроизводительную жидкостную хроматографию принято называть ВЭЖХ и УПЖХ. Разница между ВЭЖХ и УПЖХ заключается в максимальном давлении, которое может выдержать прибор. Приборы UPLC могут проводить анализ быстрее и при этом сохранять точность в большинстве случаев по сравнению с HPLC. В ВЭЖХ и УПЖХ поток растворителя под высоким давлением помогает перемещать соединения от инжектора к детектору. Как и в случае с ГХ, существует несколько типов детекторов, которые обычно используются для анализа каннабиноидов. UV-Vis (ультрафиолетовая видимая спектроскопия) детекторы используют длины волн света, проходящего через образец, чтобы измерить, что там находится. Фотодиодные матрицы (PDA) и флуоресцентные детекторы используют определенные длины волн света для возбуждения соединений в детекторе, которые затем измеряются по мере того, как они испускают фотоны света, падающие обратно в менее энергичное состояние. ВЭЖХ и ВЭЖХ также могут быть оснащены МС-детекторами. Обычно они являются вторым детектором в линии после детекторов PDA или UV-Vis.
Измерение каннабиноидов в системе ВЭЖХ или ВЭЖХ может проводиться без испарения образца с использованием тепла. В результате анализ с помощью ВЭЖХ или УПЖХ лучше всего имитирует режим использования съедобных или проглатываемых образцов. Не нагревая образец во время пробоподготовки или анализа, можно получить различную информацию о каннабиноидах, чтобы понять свойства образца как съедобной формы каннабиса. Важно понимать, находятся ли каннабиноиды в кислой или декарбоксилированной форме для целей употребления каннабиса внутрь в терапевтических или рекреационных целях. ТГК-кислота и КБД-кислота обладают совершенно разными психоактивными и терапевтическими свойствами по сравнению с декарбоксилированными ТГК и КБД. Например, ТГК-кислота не вызывает опьянения, в то время как нагретый ТГК вызывает сильное опьянение при пероральном употреблении в очень малых количествах. Например, одна пероральная доза ТГК составляет 15 мг. Важно проанализировать образцы для перорального употребления с помощью ВЭЖХ, если ты не уверен в том, декарбоксилированы ли каннабиноиды, и тебе нужно проверить содержание препарата для перорального употребления. Многие производители употребляемых внутрь препаратов конопли не понимают четко условий для полного превращения каннабиноидных кислот в ТГК и КБД, в результате чего во многих случаях получаются частично декарбоксилированные эдиблы и настойки. В некоторых случаях важно убедиться, что декарбоксилирования НЕ произошло, для тех пациентов, которые хотят использовать программу терапии каннабиноидными кислотами, специально избегая декарбоксилированных форм.
Одна из причин, по которой важно ограничить использование ВЭЖХ и ВЭЖХ конкретными образцами, где это необходимо, связана с большим количеством экологически токсичных опасных отходов, которые образуются в результате проведения анализа методом ВЭЖХ. Как было описано ранее, для перемещения аналита от инжектора к детектору используется поток растворителя под высоким давлением. Этот поток растворителя обычно представляет собой смесь ацетонитрила и изопропилового спирта. Его удел — бутылка с опасными отходами, поэтому следует избегать ненужных ВЭЖХ-анализов, стремясь к низкому воздействию на окружающую среду, и ограничивать использование этого метода проглатываемыми образцами, где он действительно необходим. В качестве примера можно привести настойки, сок каннабиса, пищевые добавки и капсулы.
Съедобные продукты из каннабиса
Две разные почки конопли имеют разные каннабиноидные профили.
Сравнение результатов тестирования — ВЭЖХ против ГХ
Вторая причина, по которой ВЭЖХ и ВЭЖХ не следует использовать для образцов, предназначенных для ингаляций, заключается в том, что результаты не выражаются в той форме, в которой каннабиноиды будут потребляться при нагревании и вдыхании — декарбоксилированные формы ТГК и КБД, — и могут создать ощущение более высокой потенции, чем содержится в каннабисе. Для пациентов, принимающих определенную дозировку, важно иметь возможность точно рассчитать потребленные ТГК и КБД. Результаты ВЭЖХ и ВЭЖХ-анализа покажут THCA, THC, CBDA и CBD в дополнение к другим каннабиноидам, таким как CBN и CBG. Многие лаборатории, использующие ВЭЖХ/ВЭЖХ для каннабиноидного анализа цветов, выражают свои окончательные результаты как THC=THCA THC в образце. Это может сбить с толку потребителя, потому что значение THCA неправильно математически переводится в эквивалентное количество декарбоксилированного ТГК. ТГК — это та форма, которая будет ощущаться потребителем при курении или испарении, поэтому мера потенции для каннабиса, предназначенного для вдыхания, должна выражаться в нейтральной форме или форме ТГК, а не ТГК.
Выражение результатов в виде THC THCA может привести к тому, что результаты «THC» будут выше, чем те, которые пользователь испытает при курении или выпаривании, из-за следующих соображений: THCA и CBDA — более тяжелые молекулы, чем THC и CBD. Чтобы выразить общее количество декарбоксилированного ТГК, которое может содержаться в образце, ты должен сначала скорректировать значение THCA, умножив THCA или CBDA на коэффициент 0,88, чтобы учесть эту разницу в молекулярном весе. Понимание преобразований, приведенных на рисунке ниже, поможет тебе сравнить результаты, полученные с помощью ВЭЖХ/ВЭЖХ и ГХ. Тебе также следует обратить внимание на то, выражены ли результаты в сухом весе или нет. Ты должен знать, как лаборатория, услугами которой ты пользуешься, рассчитывает и выдает результаты, чтобы знать, нужно ли тебе выполнять какие-либо преобразования, указанные ниже, чтобы сделать результаты значимыми для того, как ты будешь использовать каннабис.
Чтобы преобразовать THCA в THC:
- Умножь значение THCA на 0,88%
- Пример: 21% THCA × 0,88 = 18,5% THC
Чтобы преобразовать ТГК в ТГК:
- Умножь значение THCA на 1,14
- Ejemplo: 17% THC × 1,14 = 19,4% THCA.
То же самое относится к CBDA и CBD
Как видишь, в зависимости от типа твоего образца (цветок, концентрат, съедобное или настойка) один тип оборудования может дать более значимые результаты, в зависимости от того, как ты используешь каннабис.
- Каннабис для ингаляционных образцов, таких как цветы и концентраты для курения или выпаривания , следует анализировать методом ГХ.
- Каннабис для перорального приема следует анализировать методом ВЭЖХ или ВЭЖХ, если состояние декарбоксилирования неизвестно или непроверено.
- Оценивая результаты анализов, ты должен знать, выражены ли они в терминах:
- Кислотные формы или декарбоксилированные формы.
- Сухой вес или полная влажность.
Многие пациенты и фермеры интересуются, какие результаты являются типичными и как информация варьируется в зависимости от сорта:
Рейтинг потенции | Потенция ТГК (% по весу) |
слабый | 3-10 |
умеренная | 10-16 |
сильная | 17-20 |
очень сильный | 21 |
Типичные результаты содержания ТГК в цветах конопли
- Варьируется от слабого до очень сильного
- Средний показатель: 16.5 процентов
Рейтинг потенции | Потенция CBD (% по весу) |
низкая | 0-2 |
умеренная | 3-5 |
высокая | 6-20 |
Типичные результаты по содержанию CBD в цветах конопли
Часто не обнаруживается в значительных количествах
Всегда сопровождается ТГК
Богатые CBD: >4% CBD по весу
Альтернативные методы проверки потенции: Тонкослойная хроматография (TLC)
Тесты с помощью тонкослойной хроматографии измеряют каннабиноидный профиль на наличие до 6 каннабиноидов: THC, THCV, CBD, CBN, CBG, CBC, а также соответствующих им кислот. Тесты стоят около 10 долларов США каждый и требуют некоторой практики для точного выполнения. Образец готовится и смешивается с растворителем. Селективный краситель определяет уровень каннабиноидов и отображает его на промокательной бумаге. Затем результаты интерпретируются и сравниваются с графиком. Каждый каннабиноид по-разному реагирует с красителем, в результате чего получаются характерные цвета. Подробнее о тонкослойной хроматографии читай на сайте www.alpha-cat.org.
Один сегмент поставщиков услуг представляет результаты TLC (тонкослойной хроматографии) на так называемых «тест-полосках» В некоторых случаях эти тест-полоски рекламируются как способные обеспечить точные результаты определения потенции каннабиса. В целом, без специализированного оборудования тест-полоски пригодны для использования только для того, чтобы определить наличие или отсутствие определенных каннабиноидов, но не для того, чтобы определить их количество (то есть потенцию).
Как пациенты могут использовать результаты определения потенции
Пациенты часто сталкиваются с головокружительным количеством вариантов в диспансере медицинского каннабиса. Точная информация о потенции каннабиноидов может помочь пациентам выбрать лучший медицинский каннабис для своего недуга или состояния. Зная немного о различных эффектах и медицинском применении различных каннабиноидов, пациент может получить успешный и эффективный опыт. ТГК — это основной активный ингредиент каннабиса, отвечающий за некоторые из его опьяняющих эффектов. ТГК часто используется для лечения боли, тошноты, бессонницы и потери аппетита — наряду со многими другими недугами. CBD — второй по распространенности каннабиноид, он считается неинтоксикационным компонентом конопли, хотя при его употреблении у большинства людей наблюдаются явные эффекты, изменяющие настроение. CBD облегчает мышечные спазмы, судороги и тревогу, обладает антибактериальной и противоопухолевой активностью, а также продлевает действие ТГК. CBN — это продукт распада ТГК. Присутствие CBN может указывать на то, что продукт старый или хранился неправильно. CBN образуется, когда ТГК со временем подвергается воздействию ультрафиолета и кислорода. CBN обладает некоторыми терапевтическими свойствами и, как было показано, снижает частоту сердечных сокращений и уменьшает судороги. Каннабиноидные кислоты, такие как THCA и CBDA, по отзывам пациентов, приносят облегчение от симптомов спастичности и судорог.
В диспансерах медицинского каннабиса, таких как Abatin Wellness Center в Сакраменто, штат Калифорния, есть все необходимое.
Проверь каннабиноидный профиль вегетативных растений, чтобы понять, являются ли они кандидатами для программы разведения.
Тестирование каннабиноидной потенции как инструмент для фермера и селекционера
Поскольку число пользователей медицинского каннабиса продолжает расти, постоянно увеличивается спрос на варианты с определенным соотношением ТГК:КБД. Аналогичным образом растет спрос на каннабис с наивысшим уровнем потенции, поскольку потенция легко переводится в количество активных соединений и ценность каннабиса на современном рынке. Спрос на каннабис с определенным соотношением THC:CBD часто обусловлен тем, что население страдает определенным недугом или болезнью. Один из таких примеров, получивших широкую известность в настоящее время, касается особых потребностей детей с типом эпилепсии, известным как синдром Драве. Сообщения о 400-800 припадках в день не являются редкостью для этих детей, которые также страдают от проблем с развитием, когнитивными и эмоциональными способностями. Отчаяние заставляет родителей этих детей проводить эксперименты с экстрактами каннабиса в качестве лечения состояния своего ребенка. Тип каннабиса, необходимый этим детям для уменьшения приступов, почти полностью состоит из CBD и очень небольшого количества THC. Предпочтительное соотношение ТГК:КБД для большинства детей с синдромом Драве, получающих лечение каннабисом, составляет 1:20 или больше. Впервые этот вид каннабиса был выделен и идентифицирован всего за 4 года до публикации этой книги. На тот момент было известно только одно растение и источник. Чудо, которое представлял собой этот конкретный вид каннабиса для семей этих детей, подтолкнуло каннабис с содержанием CBD в сторону мейнстрима, как показано в документальном фильме доктора Санджея Гупты на CNN. В результате спрос на каннабис с таким специфическим соотношением ТГК:КБД резко вырос.
Профили каннабиноидов 14 различных сортов конопли представлены на этой странице тестов тонкослойной хроматографии.
Как только был выделен первый штамм 1:20 (известный как ACDC), в независимой лаборатории каннабиса в Калифорнии на основе предварительных исследований, проведенных Пачифико и др. в Италии, была разработана методика, которая позволила бы быстро вывести и изолировать этот редкий и теперь важный вид каннабиса. В Pure Analytics была разработана программа для анализа и интерпретации данных о каннабиноидах на вегетативной стадии развития, чтобы облегчить быстрое выделение высокого содержания КБД, определение соотношения и оптимизацию потенции КБД и ТГК, а также предсказание абсолютных цифр потенции при отборе образцов растений на правильной стадии развития. Только за один вегетационный сезон 2014 года были выделены сотни фенотипов 1:20 THC:CBD, которые должны были быть выращены в растения и доступны на рынке медицинского каннабиса. Эта техника, при правильном выполнении и верной интерпретации данных, может позволить фермерам получить хрустальный шар, о котором они всегда мечтали, — увидеть, что произведут цветы, еще до того, как они сформируются.
После приготовления и тестирования круги-образцы измеряются пластиковым калибровочным измерительным инструментом, чтобы определить уровень каннабиноидов.
С помощью теста на каннабиноиды на вегетативной стадии, проведенного по фирменному протоколу, разработанному лабораторией Pure Analytics в Калифорнии, фермер может определить соотношение ТГК:КБД на ранней стадии цикла роста, выявить растения с наибольшим потенциалом накопления каннабиноидов и получить прогноз конечной потенции цветка. Фермер может определить соотношение каннабиноидов как у мужских, так и у женских растений, и эти соотношения будут сохраняться на протяжении всего процесса созревания и цветения растения. То есть соотношение каннабиноидов 1:20, определенное у двухнедельного вегетативного растения, приведет к появлению цветков с таким же соотношением ТГК:КБД. Эта методика также позволяет выявить проростки с наибольшим потенциалом накопления каннабиноидов, что дает фермеру возможность определить свои самые мощные штаммы с желаемым соотношением ТГК:КБД еще на вегетативной стадии. Это мощное достижение, позволяющее клонировать как самок, так и самцов с желаемыми признаками на вегетативной стадии, чтобы обеспечить стратегическое массовое разведение генетически идентичных клонов, создавая таким образом более последовательную результирующую популяцию семян. Более подробную информацию об использовании тестирования на вегетативной стадии ты найдешь на сайте www.pureanalytics.net/blog.
Сильноурожайный, богатый CBD сорт ‘Cannatonic × Sour Tsunami’ был выведен с помощью тестов, предоставленных Pure Analytics.
Измеряй содержание каннабиноидов в мужских растениях до того, как они зацветут. Выбирай самцов с желательными каннабиноидными профилями для программ разведения.
Тестирование безопасности каннабиса — пестициды, микробиологические и другие загрязнители
Хотя тестирование каннабиноидов бесконечно увлекательно, другие виды тестирования каннабиса также имеют значение для здоровья и благополучия пациентов, употребляющих каннабис, производство которого они не контролировали. Многие медицинские каннабисные диспансеры проводят тесты на различные виды загрязнений, которые могут быть вредны для пациентов. К ним относятся анализ на пестициды и микробиологический анализ, а также тесты на химические остатки, такие как растворитель, примеси растворителя, тяжелые металлы и остатки питательных веществ. Существует множество различных способов проведения того или иного вида анализа. Например, анализ на пестициды может проводиться с помощью различных приборов.
Для пестицидов важно, чтобы каждый раз проводился хроматографический анализ, и чтобы анализ был достаточно чувствительным, чтобы быть значимым. Существуют «короткие пути», которые заманчиво использовать, потому что они дешевле и быстрее, но они не являются адекватной заменой полноценному хроматографическому анализу. Проблема с такими «короткими» способами, как иммуноферментный анализ или общий анализ с использованием масс-спектрометра для обнаружения, заключается в том, что они, как правило, не могут достичь предела обнаружения, который был бы действительно значимым по отношению к потенциальному загрязнению пестицидами. Например, если загрязнитель может представлять опасность для здоровья при концентрации 50 частей на миллиард или мкг/кг, то анализ пестицидов, который может обнаружить загрязнение только на более высоких уровнях, таких как 100 частей на миллион или мг/кг, не будет значимым или особенно полезным.
Сравнивая различные подходы к анализу пестицидов, ты должен учитывать несколько ключевых моментов:
- Используемое оборудование.
- Чувствительность метода, которую также называют «пределом обнаружения».
- Соединения, которые анализируются и по которым составляются отчеты.
- Используются ли сертифицированные третьей стороной эталонные стандарты при определении положительного попадания.
Важно понимать, что не каждый тип оборудования из перечисленных способен увидеть все пестициды, которые могли быть использованы. Некоторые детекторы очень специфичны, а некоторые — более общие. Из этого следует, что чем более обобщенным является детектор, тем более сниженной будет его чувствительность к потенциальному загрязнению пестицидами. Как уже отмечалось ранее, масс-спектрометр, если он не настроен особым образом, не является лучшим выбором для обнаружения пестицидного загрязнения из-за более высокого порога обнаружения, то есть он, скорее всего, не сможет заметить загрязнение следового уровня. Использование масс-спектрометрического обнаружения также может привести к появлению вредных привычек в лаборатории. Анализ пестицидов — дело не тривиальное и не дешевое. Для правильного выполнения каждый класс пестицидов должен анализироваться и оцениваться отдельно с использованием детектора, наиболее чувствительного к данному классу соединений. Например, хлорсодержащие пестициды всегда следует подтверждать методом ГХ-ЭХД (газовая хроматография с детектированием по захвату электронов), а феноксикислотные гербициды — методом ВЭЖХ-ФД (высокоэффективная жидкостная хроматография с флуоресцентным детектированием). Кроме того, их всегда следует подтверждать по сертифицированному эталонному материалу пестицида. То есть, если сообщается о наличии миклобутанила, то вместе с образцом должен был быть проанализирован миклобутанил, приобретенный в качестве сертифицированного третьей стороной эталонного стандарта у химической компании. Если этого не было сделано, то результат не был подтвержден. Это подводит нас к объяснению того, как использование масс-спектрометров может привести к вредным привычкам в лаборатории.
ТИПЫ ПРИБОРОВ, ПОДХОДЯЩИХ ДЛЯ АНАЛИЗА ПЕСТИЦИДОВ
Аббревиатура Оборудование | Описание |
ГХ-ФИД | газовая хроматография с пламенно-ионизационным детектированием |
GC-ECD | газовая хроматография с электронно-захватным детектированием |
ГХ-МС | газовая хроматография с масс-спектрометрическим детектированием |
GC-PFPD | газовая хроматография с импульсным пламенно-фотометрическим детектированием |
GC-NPD | газовая хроматография с азотно-фосфорным детектированием |
ВЭЖХ o UPLC-UV-Vis | высоко- или сверхвысокоэффективная жидкостная хроматография с УФ-визуальным фотометрическим детектированием |
ВЭЖХ o UPLC-MS | высоко- или сверхвысокоэффективная жидкостная хроматография с масс-спектрометрическим детектированием |
ВЭЖХ o UPLC-PDA | высоко- или сверхвысокоэффективная жидкостная хроматография с детектированием с помощью фотодиодной матрицы |
ВЭЖХ o UPLC-FD | высоко- или сверхвысокоэффективная жидкостная хроматография с флуоресцентным детектированием |
Масс-спектрометры — это удивительное оборудование, обладающее огромными возможностями для идентификации неизвестных соединений, которые могут находиться в смеси. Масс-спектрометры оснащены доступом через свое программное обеспечение к мощной базе данных NIST (Национального института стандартов и технологий), разработанной за многие годы тысячами ученых, которые предоставили свои данные в NIST. Это позволяет запустить поиск по базе данных относительно точки данных, полученной в результате масс-спектрального анализа. Программа ищет в базе данных и находит ближайшее совпадение с оценкой вероятности того, что это истинный результат. Это приемлемо для предварительной идентификации загрязнителя, но не является основанием для сообщения о его присутствии. Для того чтобы результат, идентифицирующий конкретное соединение, был легитимным, его необходимо сверить с сертифицированным химическим стандартом для того же соединения.
Вот несколько ключевых вопросов, которые следует задать поставщику услуг, узнав об их анализе пестицидов:
1. Какое оборудование ты используешь для проведения анализа на пестициды?
- Ты хочешь услышать в ответе слово «хроматограф». Как минимум, все образцы нуждаются в хроматографическом анализе на одном из типов оборудования, перечисленных здесь) . Учти, что не все оборудование обладает одинаковой чувствительностью или может «видеть» одни и те же соединения…
2. На какие соединения ты проводишь анализ?
- Они должны быть в состоянии предоставить тебе список соединений, которые они могут обнаружить. Если какого-то соединения нет в их списке, они не «увидят» его в анализе.
- Если тебе ответят: «Мы тестируем на все», это может означать, что они не используют сертифицированные эталонные стандарты. Именно такой ответ часто дают те, кто проводит масс-спектральный анализ. Вероятно, не только не используются эталонные стандарты, но и предел обнаружения вряд ли будет значимым.
3. Каков твой предел обнаружения?
- Ты хочешь услышать «диапазон от частей на миллиард (ppb) до низких частей на миллион (ppm)» Предел обнаружения может варьироваться в зависимости от того, о каком химическом веществе идет речь.
- Это также может выглядеть как диапазон от мкг/кг до низкого диапазона мг/кг.
Микробиологические анализы также используются для проверки медицинского каннабиса. Большинство поставщиков услуг проводят скрининг на заражение плесенью и грибком, в то время как другие также проводят скрининг на бактериальное заражение, которое становится более значимым в отношении продуктов, предназначенных для перорального приема. Методы, используемые для выявления микробиологического загрязнения, включают микроскопию, анализ ПЦР (полимеразная цепная реакция), посев и культивирование с использованием пластин, которые могут указывать на классы организмов, анализ на микотоксины методом TLC и многое другое. Все методы, кроме микроскопии, могут давать ложноположительные результаты из-за неправильного обращения с образцами или их перекрестного загрязнения.
Анализ на тяжелые металлы обычно проводится с помощью ICP-MS (масс-спектрометра с индуктивно-связанной плазмой) и, если все сделано правильно и по определенным методикам, дает достаточно надежный анализ. Остатки питательных веществ могут анализироваться различными методами в зависимости от того, какой тип загрязнения предполагается. ICP-MS и ионная хроматография будут двумя наиболее вероятными подходами.
Фокус на безопасности — заражение аспергиллом, почему это важно
Aspergillus — это род, состоящий из более чем нескольких сотен видов плесени. Она встречается в большинстве климатических зон, где растет конопля. Некоторые виды Aspergillus могут вызывать тяжелые заболевания у животных — в том числе и у людей. Aspergillus fumigatus и A. flavus — самые проблемные, потому что они производят афлатоксин, токсин и канцероген. Оба вида могут загрязнять каннабис, в том числе и пищевые продукты. Виды A. fumigatus и A. clavatus обычно вызывают аллергические заболевания. Другие виды Aspergillus часто заражают зерновые культуры.
Выращивание органического медицинского каннабиса — один из лучших способов избежать заражения лекарства.
Легочный аспергиллез обычно вызывается A. fumigatus, который приводит к инфекции околоносовых пазух. Симптомы включают кашель, боль в груди, лихорадку и одышку; эти общие симптомы затрудняют диагностику. Пациенты с астмой, муковисцидозом, синуситом, СПИДом, слабой иммунной системой и слабыми легкими восприимчивы, как и пациенты, проходящие химиотерапию.