Вимірювання канабіноїдів – Розділ 2

Саманта Міллер, президент і головний науковий співробітник лабораторії канабісу Pure Analytics.

З появою диспансеру медичного канабісу з’явилося кілька інших видів бізнесу та постачальників послуг, які допомагають задовольнити їхні потреби, зокрема лабораторії, які тестують продукти для індустрії медичного канабісу. До легалізації медичного канабісу тестування канабісу обмежувалося аналізом, який проводився в рамках кримінального розслідування або в межах однієї з небагатьох дослідницьких програм, наприклад, в Університеті Міссісіпі під керівництвом доктора Махмуда Ель-Сольхі або в Ізраїлі під керівництвом доктора Рафаеля Мечулама, які проводять дослідження, санкціоновані урядом.

Сьогодні розвиток і вдосконалення незалежних лабораторій тестування канабісу в державах, де легалізовано медичний і рекреаційний канабіс, представляє собою захоплюючий прогрес як у пошуку медичного канабісу, вирощеного і переробленого відповідно до встановлених стандартів. Захоплює також створення потужного інструменту для незалежних фермерів, які вирощують канабіс, для управління стратегічними програмами селекції, спрямованими на ізоляцію ознак, що представляють інтерес, і підвищення потенції за допомогою тестування на вегетативній стадії, щоб допомогти у відборі рослин для розведення або вирощування. “Тестування канабіноїдного потенціалу як інструмент для фермерів та селекціонерів”.

Доктор Мечулам читає лекцію в Єврейському університеті в Єрусалимі

Лабораторії, що спеціалізуються на аналізі канабісу, проводять кілька видів тестування для підтримки моделі медичного диспансеру, включаючи тестування на потенцію канабіноїдів; мікробіологічний скринінг на наявність плісняви, грибків і бактерій; і тестування на пестициди, яке шукає залишки шкідливих хімікатів, які могли застосовуватися під час циклу росту. З поширенням послуг з тестування та легалізації канабісу, а також швидким розвитком і змінами на ринку продуктів, змінювалися і пропозиції лабораторій, що займаються дослідженням канабісу. Зараз багато лабораторій пропонують тестування на наявність ароматизаторів та ароматичних сполук (відомих як терпени), що містяться в канабісі. Тяжіння до хімічно видобутих концентратів, відомих як віск, крихта, мазки тощо, також призвело до попиту на специфічні послуги, такі як тестування на залишковий розчинник і тестування на токсичні домішки, що містяться в низькосортних бутані, пропані та CO2, які часто використовують для виготовлення воску. У регіонах, де регулюванню приділяється особлива увага, ви також знайдете вимоги, встановлені державою, наприклад, у штаті Невада, які передбачають обов’язкове тестування на вміст важких металів і залишкових добрив та поживних речовин.

На цій фотографії, зробленій Полом Клемонсом, диспансер медичного канабісу Florin Wellness Center (FWC) веде жвавий бізнес.

Перша лабораторія канабісу в США відкрилася в Колорадо. За нею швидко з’явилося багато інших, більшість у Каліфорнії, де бурхливий ринок диспансерів призвів до появи сотень диспансерів в межах одного міста майже за одну ніч. Найпоширеніший вид тестування, який проводять конопляні лабораторії, – це тестування канабіноїдної потенції. Тестування потенції надає пацієнтам, які вживають медичний канабіс, важливу інформацію про активні сполуки, що містяться в їхньому канабісі. Це може допомогти їм вибрати правильний канабіс для них, виходячи з їхнього конкретного захворювання, повідомивши їм, які активні сполуки присутні та їхню відносну кількість. До канабіноїдів, які зазвичай тестують, належать ТГК, ТГКК, КБД, КБД, КБН, КБС і КБГ, а незабаром до них додадуться ТГКВ і КБДВ, завдяки зусиллям хімічних компаній-виробників, які підтримують специфічні потреби галузі тестування канабісу.

Американські лабораторії канабісу обмежені в кількості канабіноїдів, які вони можуть законно включати в аналіз, залежно від того, які канабіноїди можна придбати в якості сертифікованих еталонних стандартів у компаній-виробників хімічних стандартів у США. На момент публікації цієї книги еталонні стандарти канабіноїдів, доступні в США для використання аналітиками, включають THC, THCA, CBD, CBDA, CBG, CBN, CBDV і CBC. Ці еталонні стандарти являють собою очищені канабіноїди в розчині і використовуються для калібрування обладнання, що використовується для вимірювання потенції. Ці сертифіковані еталонні розчини дозволяють хіміку ідентифікувати та кількісно оцінити канабіноїди, присутні в екстракті. Коли обладнання правильно відкаліброване з використанням сертифікованих еталонних стандартів, дві різні лабораторії можуть вимірювати один і той самий екстрагований канабіс і видавати схожі результати. Деякі конопляні лабораторії воліють звітувати про канабіноїди на основі теоретичних даних, а не перевірки ідентичності та кількості на основі використання сертифікованого хімічного еталонного стандарту. Така практика може бути прийнятною в дослідницькому середовищі, але вона неприйнятна в умовах, орієнтованих на пацієнта, де постачальники послуг повинні працювати за тими ж стандартами, “як якщо б” їхня діяльність регулювалася федеральним урядом, а їхні аналізи були “сертифіковані” Однак на переповненому і висококонкурентному ринку постачальників послуг багато хто “дотягнеться” до того, щоб заявити, що вони можуть надавати послуги або проводити аналізи на певні сполуки, такі як екзотичні та рідкісні канабіноїди, які інші не можуть, намагаючись розвинути конкурентну перевагу на ринку тестування на канабіс. Якщо ніхто інший не проводить тестування на певну сполуку, на це, ймовірно, є причина, і легітимність аналізу може бути поставлена під сумнів. Це підводить нас до думки про важливість вибору постачальника послуг, який може надати надійні та точні результати.

Різні концентрати канабісу (зліва направо): віск, кратер, бабл-хеш і пресований кіф (гашиш).

Вибір канабіс-лабораторії

Коли диспансери, пацієнти та фермери вирішують обрати постачальника послуг, який підходить саме їм, швидко може здатися, що вони продираються крізь плутанину думок, маркетингових виступів та варіантів. Маючи під рукою факти про процеси тестування та обладнання, що відповідають вашим власним потребам, ви зможете обрати найкращого постачальника послуг, який задовольнить ваші потреби.

Тестування потенції канабіноїдів викликало найбільше суперечок на етапі становлення індустрії незалежних лабораторій тестування канабісу в США. Це призвело до численних сліпих тестувань постачальників послуг у регіоні різними групами, які прагнули або легітимізувати процес тестування, або, скоріше, виявити недоліки в практиці постачальників послуг з тестування на канабіс. Один з таких “кільцевих тестів”, опублікований у журналі про медичний канабіс О’Шонессі у 2011 році, був проведений каліфорнійським NORML і включав лабораторії канабісу, які на той час надавали послуги в штаті Каліфорнія. Результати, отримані від 10 лабораторій, були досить показовими і підтвердили той факт, що для того, щоб результати різних лабораторій добре узгоджувалися між собою, необхідно використовувати сертифіковані стандартні зразки. У тих лабораторіях, які “створили власні” хімічні еталони замість того, щоб купувати сертифіковані, результати значно відрізнялися від решти лабораторій, тоді як у кількох лабораторіях спостерігалася хороша узгодженість результатів. Тест виявив кілька основних принципів, які можуть слугувати орієнтиром при оцінюванні лабораторії коноплярства.
Розуміння процесів тестування та обладнання може допомогти вам зорієнтуватися у виборі постачальників послуг та варіантів тестування, які найкраще відповідають вашим потребам. Різні постачальники послуг спеціалізуються на різних типах зразків і пропонують різні варіанти аналізу. У нерегульованому середовищі тестування канабісу на момент написання цієї статті не існує чітко визначеного способу проведення певного типу аналізу. Це призводить до того, що використовуються різні методи, що заплутує пацієнта і фермера в інтерпретації та розумінні того, як порівнювати результати різних постачальників послуг. Знання кількох ключових моментів може допомогти вам рухатися в правильному напрямку.

У цьому врожаї бутонів “Бубба Куш” було виміряно від 13 до 19 відсотків ТГК. Зразки були взяті з різних частин рослини.

ПОРІВНЯННЯ ТГК І HPLC АБО UPLC

Процес тестування потенції

Основні етапи процесу тестування потенції, які впливають на точність і достовірність результатів, є наступними:

1. відбір зразків
2. калібрування обладнання
3. якість хімічних стандартних зразків, що використовуються
4. досвід і кваліфікація особи, яка виконує роботу

Відбір зразків може здійснюватися на декількох етапах руху канабісу від фермера до пацієнта. Спочатку продукт може бути відібраний на фермі і переданий в диспансер, який потім відбирає зразок для передачі в лабораторію, де канабіс остаточно відбирається самою лабораторією. Кожен крок на цьому шляху – а також поводження зі зразком – може вплинути на остаточний результат визначення потенції та наявність канабіноїдів, таких як КБН (продукт розпаду). Зразок канабісу на кожному етапі його обробки та відбору повинен бути репрезентативним для всієї кількості матеріалу, з якого він відібраний. Для фермера, який має кілька фунтів одного і того ж сорту канабісу, відбір репрезентативного зразка означає відбір бруньок різного розміру з різних рослин і різних частин рослини. Рекомендований розмір зразка для здачі в лабораторію становить від 0,25 до 1 грама (0,008-0,035 унції) на фунт матеріалу.

У лабораторії зразок слід подрібнити або розмолоти, щоб гомогенізувати його або зробити однорідним. Частину цього гомогенізованого зразка зважують на дуже чутливих вагах, а потім екстрагують розчинниками, такими як метанол або ізопропіловий спирт, для аналізу. Ваги, що використовуються для зважування зразків, слід регулярно калібрувати, а також зберігати датований журнал цих калібрувань. У деяких лабораторіях зразки висушують до нульового вмісту вологи перед зважуванням для аналізу. Залежно від того, скільки вологи було в рослинному матеріалі на початку, це може сильно вплинути на результати – від 3 до 10 відсотків за вагою. Екстракція зразка полягає в тому, що відміряну кількість розчинника поміщають у пробірку зі зваженим зразком канабісу. Різні лабораторії використовують різні розчинники для екстракції. Не кожен розчинник добре справляється з повним вилученням усіх канабіноїдів. Метанол, етанол та ізопропанол – найкращі варіанти для повної (також відомої як вичерпна) екстракції, тоді як ацетон і гексан, які використовують деякі постачальники послуг, не екстрагують ТГК і КБД повністю. Ця неповна екстракція може призвести до загального зниження результатів потенції. Після додавання розчинника процес екстракції може змінюватися. Деякі можуть нагрівати зразок для екстракції; інші можуть обробляти ультразвуковими хвилями або поміщати в шейкер або на стіл. Використання ультразвукової водяної бані, як правило, є найкращим методом для повного вилучення канабіноїдів. (Знайдіть дослідження цих питань екстракції розчинником на https://www.restek.com/row).

Залежно від типу зразка, що аналізується, один спосіб аналізу може бути більш підходящим, ніж інший. Більшість тестів на потенцію та вміст пестицидів у зразках канабісу передбачає аналіз зразка за допомогою певного хроматографічного обладнання. Два найпоширеніші типи – газова хроматографія (ГХ) та високоефективна або надвисокоефективна рідинна хроматографія (ВЕРХ або ВЕРХ). Ці прилади можуть бути оснащені різними типами детекторів. Деякі постачальники послуг стверджують, що вони є кращими на основі обраного ними обладнання. Обидва типи приладів дають точні і достовірні результати, якщо вони правильно відкалібровані і використовуються досвідченим оператором, який може інтерпретувати і підтверджувати отримані дані.

Газова хроматографія (ГХ)

Газовий хроматограф – це тип аналітичного обладнання, в якому потік стисненого газу низького тиску – найчастіше водню або гелію – проштовхує зразок від інжектора до детектора приладу через трубку малого діаметру, відому як колонка. Колонка в газовому хроматографі – це трубка з плавленого кремнезему довжиною від 15 до 30 метрів, покрита зсередини різними речовинами. Ці покриття і довжина трубки призводять до того, що сполуки відокремлюються одна від одної в просторі і часі, коли вони проходять через колонку. Таким чином, зразки досягають детектора окремо і можуть бути виміряні індивідуально. Якщо аналіз виконано неправильно або занадто швидко, дві сполуки можуть досягти детектора одночасно і бути виміряні як одна сполука, що призведе до помилкового результату.

Газові хроматографи можуть бути оснащені декількома типами детекторів. Найпоширенішими типами детекторів для тестування потенції канабісу є FID (полум’яно-іонізаційний детектор), MS (мас-спектрометр) і TCD (детектор теплопровідності). Детектори полум’яної іонізації та мас-спектрометричні детектори є найкращим вибором для надійного аналізу канабіноїдів за допомогою ГХ. Для аналізу пестицидів можуть використовуватися такі детектори, як ECD (детектор захоплення електронів), NPD (азотно-фосфорний детектор) або PFPD (фотометричний детектор з імпульсним полум’ям).

У випадку з усіма типами детекторів ГХ екстракт зразка, який вводиться в прилад, часто нагрівають до температури від 302ºF до 392ºF (150°C-200°C). Для того, щоб випарувати зразок і перемістити його з інжектора на колонку потоком газу, зразок також спалюють, коли він потрапляє на детектор з індуктивно-флуоресцентною хроматографією (FID). Випаровування зразка декарбоксилує або активує будь-які кислі канабіноїди так, як якщо б вони були спалені або випаровані. У детекторі мас-спектрометра зразок іонізується і фрагментується, щоб ідентифікувати присутні сполуки. Випаровування зразка робить газову хроматографію найкращим варіантом для аналізу зразків канабісу, призначених для вдихання шляхом спалювання або випаровування. З аналітичної точки зору, таке пряме вимірювання канабіноїдів у декарбоксильованому стані найкраще імітує відчуття пацієнта під час вдихання.

Шлях зразка в газовому хроматографі

Автоматичний пробовідбірник газового хроматографа

Високоефективний рідинний хроматограф. (Надвисокоефективні рідинні хроматографи мають такий самий вигляд)

Високоефективна та надвисокоефективна рідинна хроматографія (ВЕРХ і ВЕРХ)

Високоефективну та надвисокоефективну рідинну хроматографію зазвичай називають ВЕРХ і ВЕРХ. Різниця між ВЕТШХ і ВЕРХ полягає в максимальному тиску, який може витримати прилад. Прилади ВЕТШХ можуть проводити аналіз швидше і при цьому зберігати точність у більшості випадків порівняно з ВЕТШХ. У ВЕТШХ і ВЕТШХ потік розчинника під високим тиском допомагає переміщати сполуки від інжектора до детектора. Як і у випадку з ГХ, існує кілька типів детекторів, які зазвичай використовуються для аналізу канабіноїдів. Детектори UV-Vis (ультрафіолетова видима спектроскопія) використовують довжини хвиль світла, що проходять через зразок, для вимірювання вмісту. Фотодіодні детектори (PDA) і флуоресцентні детектори використовують певні довжини хвиль світла для збудження сполук у детекторі, які потім вимірюються, оскільки вони випромінюють фотони світла, що падають назад до менш енергійного стану. ВЕТШХ і ВЕТШХ також можуть бути оснащені МС-детекторами. Зазвичай це другий детектор в лінії після детекторів PDA або UV-Vis.

Вимірювання канабіноїдів у ВЕТШХ або ВЕРХ можна проводити без випаровування зразка за допомогою тепла. Як результат, аналіз за допомогою ВЕТШХ або ВЕРХ найкраще імітує режим використання для їстівних або нехарчових зразків. Не нагріваючи зразок під час пробопідготовки або аналізу, можна отримати різну інформацію про канабіноїди, щоб зрозуміти властивості зразка як їстівної форми канабісу. Для цілей вживання канабісу в терапевтичних або рекреаційних цілях важливо розуміти, чи знаходяться канабіноїди в кислотній формі, чи в декарбоксильованій формі. ТГК-кислота і КБД-кислота мають дуже різні психоактивні та терапевтичні властивості порівняно з декарбоксильованими ТГК і КБД. Наприклад, ТГК-кислота не викликає сп’яніння, тоді як нагрітий ТГК викликає сильне сп’яніння при пероральному прийомі в дуже малих кількостях. Наприклад, одна пероральна доза ТГК становить 15 мг. Якщо ви не впевнені в тому, чи були канабіноїди декарбоксильовані, і вам потрібно перевірити вміст препарату, що вживається перорально, важливо провести ВЕРХ-аналіз зразків, якщо ви не впевнені в тому, що канабіноїди були декарбоксильовані. Багато виробників препаратів канабісу для прийому всередину не мають чіткого уявлення про умови повного перетворення канабіноїдних кислот в ТГК і КБД, що призводить до появи частково декарбоксильованих продуктів і настоянок. У деяких випадках важливо переконатися, що декарбоксилювання не відбулося, для тих пацієнтів, які бажають використовувати програму терапії канабіноїдними кислотами, спеціально уникаючи декарбоксильованих форм.

Однією з причин, чому важливо обмежити використання ВЕТШХ і ВЕРХ до конкретних зразків, де це необхідно, є велика кількість екологічно токсичних небезпечних відходів, які утворюються в результаті виконання аналізу за допомогою ВЕТШХ. Як описано вище, потік розчинника під високим тиском використовується для переміщення аналіту від інжектора до детектора. Цей потік розчинника зазвичай є сумішшю ацетонітрилу та ізопропілового спирту. Його доля – пляшка для небезпечних відходів, тому слід уникати непотрібних аналізів ВЕТШХ, щоб зменшити вплив на навколишнє середовище, і використовувати цей метод лише для зразків, які можна вживати в їжу, якщо це дійсно необхідно. Деякі приклади зразків, які можна вживати в їжу, включають настоянки, сік канабісу, їстівні продукти та капсули.

Їстівні продукти з канабісу

Дві різні бруньки канабісу мають різні профілі канабіноїдів.

Порівняння результатів тестів – ВЕРХ та ГРХ

Друга причина, чому ВЕРХ і ВЕТШХ не слід використовувати для зразків, призначених для інгаляцій, полягає в тому, що результати не виражають форму, в якій канабіноїди будуть споживатися при нагріванні і вдиханні – декарбоксильовані форми ТГК і КБД – і можуть дати відчуття більш високої потенції, ніж містить канабіс. Для пацієнтів, які дотримуються певного режиму дозування, важливо мати можливість точно розрахувати кількість спожитих ТГК і КБД. Результати ВЕРХ і ВЕТШХ аналізу покажуть ТГК, ТГК, КБД і КБД на додаток до інших канабіноїдів, таких як КБН і КБГ. Багато лабораторій, які використовують ВЕРХ/УЕРХ для аналізу канабіноїдів у квітах, виражають свої остаточні результати як ТГК = ТГК/ТГК ТГК у зразку. Це може ввести в оману споживача, оскільки значення ТГКК не є належним чином математично перетвореним в еквівалентну кількість декарбоксильованого ТГК. ТГК – це форма, яку споживач відчуває при курінні або випаровуванні, тому показник потенції канабісу, призначеного для інгаляцій, повинен бути в нейтральній формі або формі ТГК, а не в формі ТГКК, через це.

Вираження результатів як ТГК ТГК може призвести до того, що результати “ТГК” будуть вищими, ніж ті, які користувач відчує при курінні або випаровуванні, з наступних міркувань: ТГКК і КБДА є більш важкими молекулами, ніж ТГК і КБД. Щоб виразити загальну кількість декарбоксильованого ТГК, який може міститися в зразку, необхідно спочатку скоригувати значення THCA, помноживши THCA або CBDA на коефіцієнт 0,88, щоб врахувати цю різницю в молекулярній масі. Розуміння перетворень на рисунку нижче може допомогти вам порівняти результати, отримані методами ВЕРХ/ВЕТШХ і ГХ. Також слід звернути увагу на те, чи виражені результати в перерахунку на суху речовину. Ви повинні знати, як лабораторія, яку ви використовуєте, обчислює та звітує про результати, щоб знати, чи потрібно виконувати якісь перетворення, зазначені нижче, щоб зробити результати значущими для того, як ви будете використовувати канабіс.

Щоб перетворити THCA в THC:

• Помножте значення THCA на 0,88%
• Приклад: 21% ТГКК × 0,88 = 18,5% ТГК

Щоб перевести ТГК в ТГКК:

• Помножте значення THCA на 1,14
• Наприклад: 17% ТГК × 1,14 = 19,4% ТГКК.

Те саме стосується CBDA та CBD

Як бачите, залежно від типу вашого зразка (квітка, концентрат, їстівний продукт або настоянка), один тип обладнання може дати більш значущі результати, залежно від того, як ви використовуєте канабіс.

• Зразки канабісу для інгаляцій, такі як квіти і концентрати для куріння або випаровування , слід аналізувати за допомогою газової хроматографії.
• Канабіс для перорального прийому слід аналізувати методом ВЕРХ або ВЕТШХ, якщо ступінь декарбоксилювання невідомий або неперевірений.
• Оцінюючи результати тесту, ви повинні знати, чи виражені вони в одиницях:
  • Кислотні форми або декарбоксильовані форми.
  • Сухої ваги або повної вологості.

Багато пацієнтів і фермерів цікавляться, які результати є типовими і як інформація змінюється залежно від штаму:

Типові результати ТГК для квітів канабісу

• Коливається від помірного до дуже сильного
• Середній: 16.5 відсотків

Типові результати КБД для квітів канабісу
Часто не зустрічається в значних кількостях
Завжди супроводжується ТГК
Багатий на КБД: >4% КБД за вагою

Альтернативні методи тестування потенції: Тонкошарова хроматографія (ТШХ)

Тести тонкошарової хроматографії вимірюють профіль канабіноїдів до 6 канабіноїдів: ТГК, ТГКВ, КБД, КБН, КБГ, КБС та відповідних кислот. Тести коштують близько 10 доларів США кожен і потребують певної практики для точного виконання. Зразок готується і змішується з розчинником. Селективний барвник виявляє рівень канабіноїдів і показує їх на промокальному папері. Потім результати інтерпретуються і порівнюються з графіком. Кожен канабіноїд по-різному реагує з барвником, що призводить до появи характерних кольорів. Більше інформації про тонкошарову хроматографію можна знайти на сайті www.alpha-cat.org.

Деякі постачальники послуг представляють результати ТШХ (тонкошарової хроматографії) на так званих “тест-смужках” У деяких випадках ці тест-смужки рекламують як такі, що здатні надати точні результати потенції канабісу. Загалом, без спеціального обладнання тест-смужки придатні лише для визначення наявності чи відсутності певних канабіноїдів, але не для визначення їхньої кількості (тобто потенції).

Як пацієнти можуть використовувати результати тесту на потенцію

Пацієнти часто стикаються з запаморочливим набором варіантів у диспансері медичного канабісу. Наявність точної інформації про потенцію канабіноїдів може допомогти пацієнтам вибрати найкращий медичний канабіс для їхньої хвороби або стану. Знання про різні ефекти та медичне застосування різних канабіноїдів може допомогти пацієнту отримати успішний та ефективний досвід. ТГК – це основний активний інгредієнт канабісу, який відповідає за деякі п’янкі ефекти канабісу. ТГК часто використовується для лікування болю, нудоти, безсоння і втрати апетиту – серед багатьох інших недуг. КБД є другим за поширеністю канабіноїдом і вважається неп’янким інгредієнтом канабісу, хоча при його вживанні у більшості людей спостерігається явний ефект зміни настрою. КБД полегшує м’язові спазми, судоми та тривожність, має антибактеріальну та протипухлинну активність, а також подовжує дію ТГК. CBN є продуктом розпаду ТГК. Наявність CBN може свідчити про те, що продукт старий або неправильно зберігався. CBN утворюється, коли ТГК піддається впливу ультрафіолету та кисню протягом тривалого часу. CBN має деякі терапевтичні властивості, зокрема, знижує частоту серцевих скорочень і зменшує кількість судом. Канабіноїдні кислоти, такі як ТГКК і КБДА, за повідомленнями пацієнтів, полегшують симптоми спастичності та судом.

Диспансери медичного канабісу, такі як Abatin Wellness Center в Сакраменто, штат Каліфорнія, добре забезпечені запасами.

Тестуйте канабіноїдний профіль вегетативних рослин, щоб дізнатися, чи є вони кандидатами на участь у селекційній програмі.

Тестування канабіноїдного потенціалу як інструмент для фермера і селекціонера

Оскільки кількість споживачів медичного канабісу продовжує зростати, постійно збільшується попит на варіанти з певним співвідношенням ТГК:КБД. Так само зростає попит на канабіс з найвищим рівнем потенції, оскільки потенція легко перекладається на кількість активних сполук і вартість канабісу на поточному ринку. Попит на канабіс із певним співвідношенням ТГК:КБД часто зумовлений населенням, яке страждає на певні недуги або захворювання. Один з таких прикладів, що набуває популярності в даний час, стосується специфічних потреб дітей з типом епілепсії, відомим як синдром Драве. Повідомлення про 400-800 нападів на день не є рідкістю для цих дітей, які також страждають від проблем розвитку, когнітивних та емоційних розладів. Відчай змушує батьків цих дітей експериментувати з екстрактами канабісу як засобом лікування стану своєї дитини. Тип канабісу, який потрібен цим дітям для зменшення нападів, майже повністю складається з КБД з дуже невеликим вмістом ТГК. Бажане співвідношення ТГК:КБД для більшості дітей з синдромом Драветта, які лікуються канабісом, становить 1:20 або більше. Цей вид канабісу був вперше виділений та ідентифікований лише за 4 роки до публікації цієї книги. На той час була відома лише одна рослина і одне джерело. Диво, яке цей конкретний вид канабісу подарував сім’ям цих дітей, підштовхнуло канабіс, багатий на КБД, до мейнстріму, як показано в документальному фільмі доктора Санджая Гупти на CNN. Як наслідок, попит на канабіс з таким специфічним співвідношенням ТГК:КБД різко зріс.

Канабіноїдні профілі 14 різних сортів канабісу представлені на цій сторінці тестів тонкошарової хроматографії.

Так само, як і перший штам 1:20 (відомий як ACDC) був вперше виділений, в незалежній лабораторії канабісу в Каліфорнії на основі попередніх досліджень, проведених Пасіфіко та ін. в Італії, була розроблена методика, яка дозволила б швидко розробити і виділити цей рідкісний і зараз важливий вид канабісу. Програма була розроблена в Pure Analytics для аналізу та інтерпретації даних про канабіноїди на вегетативній стадії, щоб полегшити швидке виділення канабісу з високим вмістом КБД, визначення співвідношення та оптимізацію потенціалу КБД і ТГК, а також прогнозування абсолютних показників потенціалу, коли рослини відбираються на правильній стадії розвитку. Лише за вегетаційний період 2014 року було виділено сотні фенотипів ТГК:КБД у співвідношенні 1:20, які мали бути вирощені в рослинах і виведені на ринок медичного канабісу. Ця методика, за умови правильного виконання та коректної інтерпретації даних, може дозволити фермерам отримати кришталеву кулю, про яку вони завжди мріяли, щоб побачити, що вироблятимуть квіти ще до того, як вони сформуються.

Після підготовки та тестування зразки кружечків вимірюють за допомогою пластикового калібрувального вимірювального інструменту, щоб визначити рівень канабіноїдів.

За допомогою тесту на вміст канабіноїдів на вегетативній стадії, проведеного за допомогою запатентованого протоколу, розробленого лабораторією Pure Analytics Lab в Каліфорнії, фермер може визначити співвідношення ТГК:КБД на ранній стадії росту, виявити рослини з найвищим потенціалом накопичення канабіноїдів і отримати прогноз кінцевого потенціалу квітки. Фермер може визначити співвідношення канабіноїдів як у чоловічих, так і в жіночих рослинах, і це співвідношення зберігатиметься протягом усього процесу дозрівання та цвітіння рослини. Це означає, що співвідношення канабіноїдів 1:20, визначене у двотижневій вегетативній рослині, призведе до утворення квітів з таким же співвідношенням ТГК:КБД. Ця методика також дозволяє ідентифікувати саджанці з найбільшим потенціалом накопичення канабіноїдів, що дає можливість фермеру визначити найпотужніші штами з бажаним співвідношенням ТГК:КБД ще на вегетативній стадії. Це потужний прогрес, що дозволяє клонувати як жінок, так і чоловіків з бажаними ознаками на вегетативній стадії, щоб уможливити стратегічне масове розведення генетично ідентичних клонів, створюючи таким чином більш послідовну насіннєву популяцію. Для отримання додаткової інформації про використання тестування на вегетативній стадії відвідайте www.pureanalytics.net/blog.

Високоврожайний, багатий на КБД сорт Cannatonic × Sour Tsunami був розроблений з використанням тестів, наданих Pure Analytics.

Виміряйте вміст канабіноїдів у чоловічих рослинах до того, як вони зацвітуть. Вибирайте чоловічі рослини з бажаним канабіноїдним профілем для селекційних програм.

Випробування канабісу на безпеку – пестициди, мікробіологічні та інші забруднювачі

Хоча тестування канабіноїдів безмежно захоплююче, інші види тестування канабісу також важливі для здоров’я і благополуччя пацієнтів, які вживають канабіс, виробництво якого вони не контролюють. У багатьох диспансерах медичного канабісу проводять тестування на різні види забруднювачів, які можуть бути шкідливими для пацієнтів. Сюди входять аналіз на пестициди та мікробіологічний аналіз, а також тести на залишки хімічних речовин, таких як розчинник, домішки розчинника, важкі метали та залишки поживних речовин. Існує багато різних способів виконання даного типу аналізу. Наприклад, аналіз на вміст пестицидів може бути виконаний за допомогою різноманітного обладнання.

Для пестицидів важливо, щоб хроматографічний аналіз виконувався кожного разу, і щоб він був достатньо чутливим, щоб мати сенс. Існують “швидкі методи”, які є спокусливими, оскільки вони дешевші і швидші, але вони не є адекватною заміною повного хроматографічного аналізу. Проблема з такими “швидкими методами”, як імуноаналітичні скринінги або загальні скринінги з використанням мас-спектрометра для виявлення, полягає в тому, що вони, як правило, не можуть досягти межі виявлення, яка є дійсно значущою відносно потенційного забруднення пестицидами. Наприклад, якщо забруднювач може становити ризик для здоров’я при концентрації 50 частин на мільярд або мкг/кг, то аналіз на пестициди, який може виявити забруднення лише на більш високих рівнях, таких як 100 частин на мільйон або мг/кг, не має сенсу і не є особливо корисним.

Порівнюючи різні підходи до аналізу пестицидів, необхідно враховувати кілька ключових аспектів:

5. Обладнання, що використовується.
6. Чутливість методу, яку також називають “межею виявлення”.
7. Сполуки, на наявність яких аналізують і про які звітують.
8. Чи використовуються при визначенні позитивного результату референтні стандарти, сертифіковані третьою стороною.

Важливо розуміти, що не кожен тип обладнання може виявити всі пестициди, які могли бути використані. Деякі детектори є дуже специфічними, а деякі – більш загальними. Звідси випливає, що чим більш узагальненим є детектор, тим більш зниженою буде його чутливість до потенційного забруднення пестицидами. Як зазначалося раніше, без спеціального налаштування мас-спектрометр не є найкращим вибором для виявлення забруднення пестицидами через його вищий поріг виявлення, що означає, що він, швидше за все, не зможе побачити забруднення на рівні слідів. Використання мас-спектрометра для виявлення забруднення також може призвести до шкідливих звичок у лабораторії. Аналіз пестицидів не є тривіальним і не є дешевим у виконанні. Щоб зробити це правильно, кожен клас пестицидів слід аналізувати і оцінювати окремо, використовуючи детектор, найбільш чутливий до цього класу сполук. Наприклад, хлоровані пестициди завжди слід підтверджувати методом ГХ-ЕСД (газова хроматографія з електронним детектуванням), а феноксикислотні гербіциди – методом ВЕРХ-ФД (високоефективна рідинна хроматографія з флуоресцентним детектуванням). Вони також завжди повинні бути підтверджені за допомогою сертифікованого референтного матеріалу пестициду. Це означає, що якщо міклобутаніл присутній у зразку, то разом із ним мав бути проаналізований міклобутаніл, придбаний як сертифікований еталонний стандарт третьою стороною у хімічної компанії. Якщо цього не було зроблено, результат не був валідований. Це підводить нас до пояснення того, як використання мас-спектрометрів може призвести до поганих звичок у лабораторії.

ТИПИ ПРИЛАДІВ, ПРИДАТНИХ ДЛЯ АНАЛІЗУ ПЕСТИЦИДІВ

Мас-спектрометри – це дивовижні прилади з величезними можливостями для ідентифікації невідомих сполук, які можуть міститися в суміші. Мас-спектрометри оснащені доступом через програмне забезпечення до потужної бази даних NIST (Національного інституту стандартів і технологій), розробленої протягом багатьох років тисячами вчених, які надсилали свої дані до NIST. Це дозволяє здійснювати пошук в базі даних відносно точки даних з мас-спектрального аналізу. Програмне забезпечення шукає в базі даних і знаходить найближчий збіг з оцінкою ймовірності того, що він є справжнім результатом. Це прийнятно для попередньої ідентифікації забруднювача, але не є підставою для того, щоб стверджувати, що сполука присутня. Для того, щоб результат був легітимним і ідентифікував конкретну сполуку, його необхідно звірити з сертифікованим хімічним стандартом на ту саму сполуку.

Ось кілька ключових запитань, які слід поставити постачальнику послуг, коли ви дізнаєтесь про їхній аналіз пестицидів:

1. Який тип обладнання ви використовуєте для проведення аналізу пестицидів?

• Ви хочете почути у відповіді “хроматограф”. Як мінімум, для всіх зразків потрібен хроматографічний екран з одного типу обладнання, перерахованого тут). Зверніть увагу, що не все обладнання має однакову чутливість або може “бачити” однакові сполуки…

2. Які сполуки ви аналізуєте?

• Вони повинні мати можливість надати вам список сполук, які вони можуть виявити. Якщо сполуки немає в їхньому списку, вони не “побачать” її в аналізі.
• Якщо вам відповіли: “Ми перевіряємо все”, це може означати, що вони не використовують сертифіковані референтні стандарти. Таку відповідь часто дають ті, хто виконує мас-спектрометричний аналіз. Мало того, що референтні стандарти, ймовірно, не використовуються, але навряд чи межа виявлення є значущою.

3. Яка ваша межа виявлення?

• Ви хочете почути “діапазон від частин на мільярд (ppb) до низьких частин на мільйон (ppm)” Виявлення може відрізнятися залежно від того, яка це хімічна речовина.
• Це також може виглядати як діапазон від мкг/кг до низьких мг/кг.

Для перевірки медичного канабісу також використовують мікробіологічні аналізи. Більшість постачальників послуг перевіряють на наявність плісняви та грибків, тоді як інші також перевіряють на бактеріальне забруднення, що стає більш значущим для продуктів, призначених для перорального вживання. Методи, що використовуються для скринінгу мікробіологічного забруднення, включають мікроскопію, ПЛР-аналіз (полімеразну ланцюгову реакцію), посіви і культивування на пластинах, які можуть вказувати на класи організмів, скринінг мікотоксинів за допомогою ТШХ тощо. Усі методи, окрім мікроскопії, можуть давати хибнопозитивні результати через неправильне поводження зі зразками або перехресне забруднення.

Аналізи на важкі метали зазвичай проводяться за допомогою мас-спектрометра з індуктивно-зв’язаною плазмою (ICP-MS) і, якщо вони виконані належним чином за визначеними методиками, дають досить надійний аналіз. Залишки поживних речовин можна аналізувати різними методами, залежно від того, який тип забруднення передбачається. Найбільш вірогідними підходами є ICP-MS та іонна хроматографія.

Зосередьтеся на безпеці – забруднення аспергілами, чому це важливо

Аспергіллус – це рід, який складається з більш ніж декількох сотень видів плісняви. Він зустрічається в більшості кліматичних зон, де росте канабіс. Деякі види Aspergillus можуть викликати серйозні захворювання у тварин, в тому числі у людей. Aspergillus fumigatus і A. flavus є найбільш проблемними, оскільки вони виробляють афлатоксин, токсин і канцероген. Обидва види можуть забруднювати канабіс, включаючи їстівні продукти. Види A. fumigatus і A. clavatus зазвичай викликають алергічні захворювання. Інші види Aspergillus часто заражають зернові культури.

Вирощування органічного медичного канабісу – один з найкращих способів уникнути заражених ліків.

Легеневий аспергільоз зазвичай викликається A. fumigatus, що призводить до інфекції придаткових пазух носа. Симптоми включають кашель, біль у грудях, лихоманку та задишку; ці загальні симптоми ускладнюють діагностику. Пацієнти з астмою, муковісцидозом, синуситом, СНІДом, ослабленою імунною системою та слабкими легенями, а також пацієнти, які проходять хіміотерапію, мають підвищену чутливість до інфекції.