Mesurer les cannabinoïdes – Chapitre 2

Par Samantha Miller, présidente et scientifique en chef du laboratoire de cannabis Pure Analytics.

Avec l’essor des dispensaires de cannabis médical, plusieurs autres types d’entreprises et de fournisseurs de services ont évolué pour aider à répondre à leurs besoins, notamment les laboratoires qui testent les produits pour l’industrie du cannabis médical. Avant l’existence de la légalisation du cannabis médical, les tests de cannabis étaient limités aux analyses effectuées dans le cadre d’enquêtes criminelles ou au sein de l’un des quelques programmes de recherche seulement, comme celui de l’Université du Mississippi, supervisé par le Dr Mahmoud ElSolhy, ou, en Israël, celui du Dr Raphael Mechoulam, qui effectuent des recherches sanctionnées par le gouvernement.

Aujourd’hui, le développement et les progrès des laboratoires indépendants d’analyse du cannabis dans les États où le cannabis médical et récréatif est légalisé représentent un progrès passionnant dans la recherche d’un cannabis de qualité médicale cultivé et traité selon des normes spécifiques. La création d’un outil puissant permettant aux cultivateurs de cannabis indépendants de mener des programmes de sélection stratégique axés sur l’isolement des caractéristiques intéressantes et l’augmentation de la puissance de manière prédictive en utilisant des tests au stade végétatif pour faciliter la sélection des plantes pour la sélection ou la culture est également passionnante. Voir « Le test de puissance des cannabinoïdes, un outil pour le cultivateur et le sélectionneur ».

Measuring cannabinoids

Le Dr Mechoulam donne une conférence à l’Université hébraïque de Jérusalem

Plusieurs types de tests sont effectués par des laboratoires spécialisés dans l’analyse du cannabis pour soutenir le modèle du dispensaire médical, notamment le test de puissance des cannabinoïdes, le dépistage microbiologique des moisissures, des champignons et des bactéries, et le test des pesticides qui recherche les résidus de produits chimiques nocifs qui ont pu être appliqués pendant le cycle de croissance. Les services d’analyse et le cannabis légalisé ont proliféré et le marché des produits a rapidement évolué et changé, tout comme les offres des laboratoires de cannabis. De nombreux laboratoires proposent maintenant des tests pour les arômes et les composés parfumés (connus sous le nom de terpènes) contenus dans le cannabis. L’engouement pour les concentrés extraits chimiquement, connus sous le nom de wax, shatter, dabs et autres, a également entraîné une demande de services spécifiques tels que les tests de solvants résiduels et les tests de détection des impuretés toxiques présentes dans le butane, le propane et le gaz CO2 de qualité inférieure, souvent utilisés pour fabriquer la wax. Dans les régions où la réglementation est au centre des préoccupations, tu trouveras également des exigences imposées par l’État, comme au Nevada, qui rendent obligatoires les tests de métaux lourds et les tests d’engrais et de nutriments résiduels.

Sur cette photo prise par Paul Clemons, le dispensaire de cannabis médical Florin Wellness Center (FWC) fait de bonnes affaires.

Le premier laboratoire de cannabis américain a ouvert ses portes au Colorado. De nombreux autres ont rapidement suivi, la majorité en Californie où le marché florissant des dispensaires a vu la prolifération de centaines de dispensaires dans une seule ville, presque du jour au lendemain. Le type de test le plus courant effectué par les laboratoires de cannabis est le test de puissance des cannabinoïdes. Les tests de puissance fournissent aux patients de cannabis médical des informations importantes sur les composés actifs de leur cannabis. Cela peut les aider à sélectionner le cannabis qui leur convient en fonction de leur affection spécifique, en leur indiquant quels sont les composés actifs présents et leurs quantités relatives. Les cannabinoïdes couramment testés comprennent le THC, le THCA, le CBD, le CBDA, le CBN, le CBC et le CBG, et bientôt le THCV et le CBDV, grâce aux efforts des entreprises de fabrication de produits chimiques qui soutiennent les besoins spécifiques de l’industrie des tests de cannabis.

Les laboratoires de cannabis américains sont limités dans les cannabinoïdes qu’ils peuvent légitimement inclure dans leurs analyses, en fonction des cannabinoïdes disponibles à l’achat en tant qu’étalons de référence certifiés auprès des entreprises de normalisation chimique aux États-Unis. Au moment de la publication de ce livre, les normes de référence des cannabinoïdes disponibles aux États-Unis pour être utilisées par les analystes sont les suivantes : THC, THCA, CBD, CBDA, CBG, CBN, CBDV et CBC. Ces étalons de référence sont des cannabinoïdes purifiés en solution, et servent à calibrer l’équipement utilisé pour mesurer la puissance. Ce sont ces solutions de référence certifiées qui permettent au chimiste d’identifier et de quantifier les cannabinoïdes présents dans un extrait. Lorsque l’équipement est correctement calibré à l’aide d’étalons de référence certifiés, deux laboratoires différents devraient pouvoir mesurer le même cannabis extrait et fournir un résultat similaire. Certains laboratoires de cannabis choisissent de rendre compte des cannabinoïdes en se basant sur des données théoriques plutôt que sur une vérification de l’identité et de la quantité basée sur l’utilisation d’un étalon de référence chimique certifié. Une telle pratique peut être acceptable dans un contexte de recherche, mais elle ne l’est pas dans un contexte axé sur le patient, où les fournisseurs de services devraient fonctionner selon les mêmes normes « comme s’ils » étaient réglementés par le gouvernement fédéral et leurs analyses « certifiées » Cependant, dans un marché encombré et hautement concurrentiel de fournisseurs de services, beaucoup « atteindront » pour prétendre qu’ils peuvent fournir des services ou analyser certains composés tels que les cannabinoïdes exotiques et rares que d’autres ne peuvent pas dans une tentative de développer un avantage concurrentiel sur le marché de l’analyse du cannabis. Si personne d’autre ne teste un composé particulier, il y a probablement une raison à cela, et la légitimité de l’analyse peut être remise en question. Cela nous amène à l’importance de choisir un prestataire de services qui peut fournir des résultats fiables et précis.

Divers concentrés de cannabis (de gauche à droite) : cire, shatter, bubble-hash et kief pressé (hash).

Choisir un laboratoire de cannabis

Lorsque les dispensaires, les patients et les cultivateurs entreprennent de choisir le prestataire de services qui leur convient, ils peuvent rapidement avoir l’impression de patauger dans une litanie confuse d’opinions, de discours marketing et d’options. Le fait d’avoir en main les faits concernant les processus et l’équipement de test relatifs à tes propres besoins peut t’aider à te guider vers le meilleur fournisseur de services pour tes besoins.

Les tests de puissance des cannabinoïdes ont été de loin les plus controversés au cours des débuts de l’industrie des laboratoires indépendants d’analyse du cannabis aux États-Unis. Cela a conduit à de nombreux tests à l’aveugle des fournisseurs de services dans une région par divers groupes cherchant soit à légitimer le processus de test, soit plutôt à exposer les failles dans les pratiques des fournisseurs de services de test du cannabis. L’un de ces « ring test », publié dans le journal du cannabis médical d’O’Shaughnessy en 2011, a été réalisé par California NORML et incluait les laboratoires de cannabis offrant des services dans l’État de Californie à l’époque. Les résultats de 10 laboratoires étaient assez révélateurs et renforçaient le fait que l’utilisation de matériaux de référence certifiés est nécessaire pour que les résultats d’un laboratoire à l’autre soient en bonne concordance. Les laboratoires qui « fabriquaient » leurs propres étalons de référence chimiques au lieu d’acheter des étalons certifiés ont obtenu des résultats très différents de ceux des autres laboratoires, alors qu’une poignée d’entre eux ont obtenu une bonne concordance. Le test a mis en lumière plusieurs principes de base qui peuvent servir de guide dans l’évaluation d’un laboratoire de cannabis.
Comprendre les processus et l’équipement de test peut t’aider à choisir les fournisseurs de services et les options de test les mieux adaptés à tes besoins. Différents prestataires de services se spécialisent dans différents types d’échantillons et offrent différentes options d’analyse. Dans l’environnement non réglementé des tests de cannabis au moment de la rédaction de cet article, il n’y a pas de manière spécifiée d’effectuer un type particulier d’analyse. Cela conduit à l’utilisation d’une variété de méthodes différentes, ce qui rend confus pour le patient et le cultivateur l’interprétation et la compréhension de la façon de comparer les résultats entre les fournisseurs de services. Connaître quelques éléments clés peut te guider dans la bonne direction.

Cette récolte de bourgeons de ‘Bubba Kush’ mesurait de 13 à 19 pour cent de THC. Les échantillons ont été prélevés sur différentes parties des plantes.

COMPARAISON DE LA GC ET DE L’HPLC OU DE L’UPLC

Chromatographie en phase gazeuseChromatographie liquide haute performance ou
Chromatographie ultra-haute performance
Un flux de gaz à basse pression aide à déplacer les composés vers le détecteurUn flux de solvant à haute pression aide à déplacer les composés vers le détecteur
Le détecteur détruit les composésLe détecteur ne détruit généralement pas les composés
Ne peut pas détecter les acides cannabinoïdesPeut détecter les acides cannabinoïdes
L’analyse ne produit PAS de déchets dangereux importants. ÉcologiqueL’analyse produit beaucoup de déchets de solvants dangereux

Le processus de test de puissance

Les étapes de base du processus de test de puissance qui affectent l’exactitude et la précision des résultats sont :

  1. l’échantillonnage
  2. l’étalonnage de l’équipement
  3. la qualité des normes de référence chimiques utilisées
  4. l’expérience et l’expertise de la personne qui effectue le travail

L’échantillonnage peut être effectué à plusieurs étapes de la circulation du cannabis, de l’agriculteur au patient. Le produit peut d’abord être échantillonné à la ferme et fourni à un dispensaire qui prélève ensuite un échantillon à soumettre au laboratoire où le cannabis est finalement échantillonné par le laboratoire lui-même. Chaque étape du processus – ainsi que la manipulation de l’échantillon – peut influencer les résultats finaux de la puissance et la présence ou non de cannabinoïdes tels que le CBN (un produit de dégradation). À chaque étape de sa manipulation et de son prélèvement, l’échantillon de cannabis doit être représentatif de l’ensemble de la quantité de matière dont il est issu. Pour l’agriculteur qui possède plusieurs livres de la même souche de cannabis, prélever un échantillon représentatif signifie faire une sélection de bourgeons de différentes tailles provenant de diverses plantes et de diverses parties de la plante. Il est recommandé de soumettre au laboratoire un échantillon de 0,25 à 1 gramme (0,008-0,035 oz) par livre de matériel.

Au laboratoire, l’échantillon doit être coupé ou broyé pour l’homogénéiser ou le rendre uniforme. Une partie de cet échantillon homogénéisé est pesée sur des balances très sensibles, puis extraite avec des solvants tels que le méthanol ou l’alcool isopropylique pour être analysée. Les balances utilisées pour peser les échantillons doivent être étalonnées régulièrement et un registre daté de ces étalonnages doit être conservé. Dans certains laboratoires, les échantillons sont séchés jusqu’à ce que leur taux d’humidité soit nul avant d’être pesés pour l’analyse. Selon la quantité d’humidité contenue dans le matériel végétal au départ, cela peut affecter considérablement les résultats, de 3 à 10 pour cent du poids. L’extraction de l’échantillon consiste à placer une quantité mesurée de solvant dans un flacon avec l’échantillon de cannabis pesé. Différents laboratoires utilisent différents solvants pour l’extraction. Tous les solvants ne parviennent pas à extraire complètement tous les cannabinoïdes. Le méthanol, l’éthanol et l’isopropanol sont les meilleures options pour une extraction complète (également appelée exhaustive), alors que l’acétone et l’hexane utilisés par certains prestataires de services n’extraient pas le THC et le CBD aussi complètement. Cette extraction incomplète entraînerait une baisse globale des résultats de puissance. Après l’ajout du solvant, le processus d’extraction peut varier. Certains peuvent chauffer l’échantillon pour l’extraire ; d’autres peuvent le soniquer en utilisant des ondes ultrasoniques, ou le mettre dans un bain ou une table d’agitation. L’utilisation d’un bain-marie à ultrasons est généralement la meilleure méthode pour une extraction complète des cannabinoïdes. (Tu trouveras une étude sur ces questions d’extraction par solvant à l’adresse https://www.restek.com/row).

Selon le type d’échantillon analysé, une méthode d’analyse peut être plus appropriée qu’une autre. La plupart des tests de puissance et de pesticides effectués sur des échantillons de cannabis impliquent l’analyse de l’échantillon à l’aide d’une certaine forme d’équipement de chromatographie. Les deux types les plus courants sont la chromatographie en phase gazeuse (GC) et la chromatographie liquide haute performance ou ultra haute performance (HPLC ou UPLC). Ces instruments peuvent être équipés de nombreux types de détecteurs différents. Certains prestataires de services prétendent être supérieurs en raison de l’équipement qu’ils ont choisi. Les deux types d’instruments donnent des résultats précis et viables lorsqu’ils sont calibrés correctement et utilisés par un opérateur expérimenté qui peut interpréter et valider les données produites.

Chromatographie en phase gazeuse (GC)

Un chromatographe en phase gazeuse est un type d’instrument analytique dans lequel un flux à basse pression de gaz comprimé – souvent de l’hydrogène ou de l’hélium – pousse un échantillon de l’injecteur au détecteur de l’instrument à travers un tube de petit diamètre appelé colonne. La colonne d’un chromatographe en phase gazeuse est un tube de silice fondue de 15 à 30 mètres de long dont l’intérieur est recouvert de diverses substances. Ces revêtements et la longueur du tube font que les composés se séparent les uns des autres dans l’espace et dans le temps lorsqu’ils traversent la colonne. De cette façon, les échantillons atteignent le détecteur séparément et peuvent être mesurés individuellement. Si une analyse n’est pas effectuée correctement ou est effectuée trop rapidement, deux composés peuvent atteindre le détecteur en même temps et être mesurés comme un seul composé, ce qui donne un résultat erroné.

Les chromatographes en phase gazeuse peuvent être équipés de plusieurs types de détecteurs. Les types de détecteurs les plus courants pour les tests de puissance du cannabis sont le FID (détecteur à ionisation de flamme), le MS (spectromètre de masse) et le TCD (détecteur à conductivité thermique). Les détecteurs FID et MS sont les meilleurs choix pour une analyse fiable des cannabinoïdes par GC. L’analyse des pesticides peut inclure des détecteurs tels que l’ECD (détecteur à capture d’électrons), le NPD (détecteur azote-phosphore) ou le PFPD (détecteur photométrique à flamme pulsée).

Dans le cas de tous les types de détecteurs GC, l’extrait d’échantillon qui est injecté dans l’instrument est souvent chauffé à des températures comprises entre 302ºF et 392ºF (150°C-200°C). Afin de vaporiser l’échantillon pour qu’il puisse être déplacé de l’injecteur à la colonne par le flux de gaz, l’échantillon est également brûlé lorsqu’il atteint un détecteur FID. Cette vaporisation de l’échantillon décarboxyle ou active les cannabinoïdes acides comme s’ils avaient été brûlés ou vaporisés. Dans un détecteur à spectromètre de masse, l’échantillon est ionisé et fragmenté afin d’identifier les composés présents. La vaporisation de l’échantillon fait de la chromatographie en phase gazeuse la meilleure option pour l’analyse des échantillons de cannabis destinés à être inhalés par combustion ou vaporisation. D’un point de vue analytique, cette mesure directe des cannabinoïdes dans leur état décarboxylé reproduit le mieux l’expérience du patient lors de l’inhalation.

Trajet de l’échantillon dans un chromatographe en phase gazeuse

Échantillonneur automatique de chromatographe en phase gazeuse

Chromatographe liquide à haute performance. (Les chromatographes liquides à ultra-haute performance ont le même aspect)

Chromatographie liquide haute performance et ultra-haute performance (HPLC et UPLC)

La chromatographie liquide haute performance et ultra-haute performance est communément appelée HPLC et UPLC. La différence entre la CLHP et l’UPLC est la pression maximale que l’instrumentation peut supporter. Les instruments UPLC peuvent analyser plus rapidement tout en maintenant la précision dans la plupart des cas par rapport à la HPLC. Dans la CLHP et l’UPLC, un flux de solvant à haute pression permet de déplacer les composés de l’injecteur au détecteur. Comme pour la chromatographie en phase gazeuse, plusieurs types de détecteurs sont couramment utilisés pour l’analyse des cannabinoïdes. Les détecteurs UV-Vis (spectroscopie ultraviolette visible) utilisent les longueurs d’onde de la lumière qui passe à travers l’échantillon pour mesurer ce qui s’y trouve. Les détecteurs à réseau de photodiodes (PDA) et de fluorescence utilisent certaines longueurs d’onde de la lumière pour exciter les composés dans le détecteur, qui sont ensuite mesurés lorsqu’ils émettent des photons de lumière retombant à un état moins énergétique. Les HPLC et UPLC peuvent également être équipés de détecteurs MS. Il s’agit généralement d’un deuxième détecteur en ligne après les détecteurs PDA ou UV-Vis.

La mesure des cannabinoïdes dans un système HPLC ou UPLC peut être effectuée sans vaporiser l’échantillon à l’aide de la chaleur. Par conséquent, l’analyse par HPLC ou UPLC imite au mieux le mode d’utilisation des échantillons comestibles ou ingérables. En ne chauffant pas l’échantillon pendant sa préparation ou son analyse, on peut obtenir différentes informations sur les cannabinoïdes afin de comprendre les propriétés de l’échantillon en tant que forme ingérable de cannabis. Il est important de comprendre si les cannabinoïdes sont ou non sous leur forme acide ou décarboxylée dans le but d’ingérer du cannabis à des fins thérapeutiques ou récréatives. Le THC-acide et le CBD-acide ont des propriétés psychoactives et thérapeutiques très différentes de celles du THC et du CBD décarboxylés. Par exemple, le THC-acide n’est pas intoxicant, alors que le THC chauffé est très intoxicant lorsqu’il est ingéré par voie orale en très petites quantités. Par exemple, une dose orale de THC est de 15 mg. Il est important d’analyser les échantillons ingérables par voie orale par CLHP si tu n’es pas sûr que les cannabinoïdes soient décarboxylés ou non et si tu as besoin de vérifier le contenu d’une préparation ingérable. De nombreux producteurs de préparations de cannabis ingérables ne comprennent pas clairement les conditions de conversion complète des acides cannabinoïdes en THC et CBD, ce qui donne lieu à de nombreux cas d’edibles et de teintures partiellement décarboxylés. Dans certains cas, il est important de vérifier qu’AUCUNE décarboxylation ne s’est produite pour les patients qui cherchent à utiliser un programme thérapeutique à base d’acides cannabinoïdes évitant spécifiquement les formes décarboxylées.

L’une des raisons pour lesquelles il est important de limiter l’utilisation de la CLHP et de l’UPLC à des échantillons spécifiques est la grande quantité de déchets dangereux toxiques pour l’environnement qui sont produits lors de l’analyse par CLHP. Comme décrit précédemment, un flux de solvant à haute pression est utilisé pour déplacer l’analyte de l’injecteur au détecteur. Ce flux de solvant est généralement un mélange d’acétonitrile et d’alcool isopropylique. Son destin est la bouteille de déchets dangereux, c’est pourquoi les analyses HPLC inutiles doivent être évitées afin d’avoir un faible impact sur l’environnement, et l’utilisation de cette méthode doit être limitée aux échantillons ingérables lorsqu’elle est vraiment nécessaire. Parmi les exemples d’échantillons ingérables, on peut citer les teintures, les jus de cannabis, les produits comestibles et les gélules.

Produits comestibles à base de cannabis

Deux bourgeons de cannabis différents ont des profils cannabinoïdes distincts.

Comparaison des résultats des tests – CLHP vs GC

Une deuxième raison pour laquelle la CLHP et l’UPLC ne devraient pas être utilisées sur des échantillons destinés à être inhalés est que les résultats ne sont pas exprimés sous la forme dans laquelle les cannabinoïdes seront consommés lorsqu’ils sont chauffés et inhalés, les formes décarboxylées THC et CBD, et peuvent donner l’impression d’une puissance plus élevée que celle que contient le cannabis. Pour les patients qui suivent un régime posologique spécifique, il est important de pouvoir calculer avec précision le THC et le CBD consommés. Les résultats des analyses HPLC et UPLC indiquent la présence de THCA, de THC, de CBDA et de CBD, ainsi que d’autres cannabinoïdes tels que le CBN et le CBG. De nombreux laboratoires qui utilisent l’HPLC/UPLC pour l’analyse des cannabinoïdes des fleurs expriment leurs résultats finaux sous la forme THC=THCA THC dans un échantillon. Cela peut prêter à confusion pour le consommateur, car la valeur du THCA n’est pas correctement convertie mathématiquement en sa quantité équivalente de THC décarboxylé. Le THC est la forme sous laquelle l’utilisateur se retrouve lorsqu’il fume ou vaporise le cannabis. C’est pourquoi la mesure de la puissance du cannabis destiné à être inhalé doit être exprimée sous la forme neutre ou THC plutôt que sous la forme THCA.

L’expression des résultats sous forme de THC THCA peut entraîner l’expression de résultats « THC » plus élevés que ce que l’utilisateur ressentira en fumant ou en vaporisant, en raison des considérations suivantes : Le THCA et le CBDA sont des molécules plus lourdes que le THC et le CBD. Pour exprimer le total de THC décarboxylé qu’un échantillon peut contenir, tu dois d’abord ajuster la valeur du THCA en multipliant le THCA ou le CBDA par un facteur de 0,88 pour tenir compte de cette différence de poids moléculaire. Comprendre les conversions de la figure ci-dessous peut t’aider à comparer les résultats générés par HPLC/UPLC et GC. Tu dois aussi te demander si les résultats sont exprimés sur la base du poids sec. Tu dois savoir comment le laboratoire que tu utilises calcule et rapporte les résultats afin de savoir si tu dois effectuer l’une ou l’autre des conversions indiquées ci-dessous pour que les résultats soient significatifs pour la façon dont tu utiliseras le cannabis.

Pour convertir le THCA en THC :

  • Multiplie la valeur du THCA par 0,88 %
  • Exemple : 21 % de THCA × 0,88 = 18,5 % de THC

Pour convertir le THC en THCA :

  • Multiplier la valeur du THCA par 1,14
  • Ejemplo : 17% THC × 1,14 = 19,4% THCA.

Il en va de même pour le CBDA et le CBD

Comme tu peux le constater, selon le type d’échantillon (fleur, concentré, comestible ou teinture), un type d’équipement peut fournir des résultats plus significatifs, en fonction de ta consommation de cannabis.s.

  • Les échantillons de cannabis destinés à être inhalés, tels que les fleurs et les concentrés destinés à être fumés ou vaporisés , doivent être analysés par GC.
  • Le cannabis destiné à être ingéré par voie orale doit être analysé par HPLC ou UPLC si l’état de décarboxylation est inconnu ou non vérifié.
  • Lorsque tu évalues les résultats des tests, tu dois savoir s’ils sont exprimés en termes de :
    • Formes acides ou formes décarboxylées.
    • Poids sec ou humidité totale.

De nombreux patients et agriculteurs se demandent quels sont les résultats typiques et comment les informations varient en fonction de la souche :

Taux de puissanceTeneur en THC (% du poids)
légère3-10
modérée10-16
forte17-20
très forte21

Résultats typiques de THC pour les fleurs de cannabis

  • De léger à très fort
  • Moyenne : 16.5 pour cent
Niveau de puissancePuissance du CBD (% en poids)
faible0-2
modérée3-5
élevée6-20

Résultats typiques de CBD pour les fleurs de cannabis
Souvent non trouvé en quantités significatives
Toujours accompagné de THC
Riche en CBD : >4% de CBD en poids

Autres méthodes de test de puissance : Chromatographie en couche mince (TLC)

Les tests de chromatographie en couche mince mesurent le profil cannabinoïde pour un maximum de 6 cannabinoïdes : THC, THCV, CBD, CBN, CBG, CBC, et leurs acides correspondants. Les tests coûtent environ 10 dollars américains chacun et il faut un peu de pratique pour les réaliser avec précision. L’échantillon est préparé et mélangé à un solvant. Un colorant sélectif détecte les niveaux de cannabinoïdes et les fait apparaître sur du papier buvard. Les résultats sont ensuite interprétés et comparés à un tableau. Chaque cannabinoïde réagit différemment avec le colorant, ce qui donne des couleurs distinctes. Tu trouveras plus d’informations sur la chromatographie sur couche mince à l’adresse www.alpha-cat.org.

Un segment de prestataires de services présente les résultats de la TLC (chromatographie en couche mince) sur ce que l’on appelle souvent des « bandelettes de test » Dans certains cas, ces bandelettes de test sont présentées comme pouvant fournir des résultats précis sur la puissance du cannabis. En général, sans équipement spécialisé, les bandelettes de test ne peuvent être utilisées que pour déterminer la présence ou l’absence de certains cannabinoïdes, mais pas pour en déterminer la quantité (c’est-à-dire la puissance).

Comment les patients peuvent-ils utiliser les résultats de puissance ?

Les patients sont souvent confrontés à un éventail vertigineux d’options dans un dispensaire de cannabis médical. Disposer d’informations précises sur la puissance des cannabinoïdes peut aider les patients à sélectionner le meilleur cannabis médicinal pour leur affection ou leur maladie. Connaître un peu les différents effets et les applications médicales des divers cannabinoïdes peut aider le patient à avoir une expérience réussie et efficace. Le THC est le principal ingrédient actif du cannabis, responsable de certains de ses effets intoxicants. Le THC est souvent utilisé pour traiter la douleur, la nausée, l’insomnie et la perte d’appétit, parmi de nombreux autres maux. Le CBD est le deuxième cannabinoïde prédominant et est considéré comme un ingrédient non intoxicant du cannabis, bien que sa consommation ait des effets évidents sur l’humeur de la plupart des gens. Le CBD soulage les spasmes musculaires, les crises d’épilepsie et l’anxiété, il est connu pour son activité antibactérienne et antitumorale, et il prolonge les effets du THC. Le CBN est le produit de dégradation du THC. La présence de CBN peut indiquer qu’un produit est vieux ou qu’il n’a pas été stocké correctement. Le CBN se forme lorsque le THC est exposé aux rayons UV et à l’oxygène au fil du temps. Le CBN possède certaines propriétés thérapeutiques et il a été démontré qu’il abaisse le rythme cardiaque et réduit les convulsions. Les acides cannabinoïdes tels que le THCA et le CBDA ont été signalés par des patients comme apportant un soulagement aux symptômes de spasticité et de convulsions.

Les dispensaires de cannabis médical comme l’Abatin Wellness Center à Sacramento, en Californie, sont bien approvisionnés.

Teste le profil cannabinoïde des plantes végétatives pour voir si elles sont candidates à un programme de reproduction.

Le test de puissance des cannabinoïdes, un outil pour l’agriculteur et le sélectionneur

Le nombre de consommateurs de cannabis médical étant en augmentation, la demande d’options présentant des rapports THC:CBD spécifiques ne cesse de croître. De même, la demande de cannabis ayant les niveaux de puissance les plus élevés augmente, car la puissance se traduit par la quantité de composés actifs et la valeur du cannabis sur le marché actuel. La demande de cannabis avec des rapports THC:CBD spécifiques est souvent motivée par une population souffrant d’une affection ou d’une maladie particulière. Un exemple qui gagne en notoriété en ce moment concerne les besoins spécifiques des enfants atteints d’un type d’épilepsie connu sous le nom de syndrome de Dravet. Des rapports faisant état de 400 à 800 crises par jour ne sont pas rares pour ces enfants, qui souffrent également de problèmes de développement, cognitifs et émotionnels. Le désespoir pousse les parents de ces enfants à poursuivre l’expérimentation d’extraits de cannabis comme traitement de l’état de leur enfant. Le type de cannabis dont ces enfants ont besoin pour réduire leurs crises est presque entièrement composé de CBD et de très peu de THC. Le rapport THC:CBD préféré de la plupart des enfants Dravet traités au cannabis est de 1:20 ou plus. Ce type de cannabis n’a été isolé et identifié qu’environ quatre ans avant la publication de ce livre. À l’époque, on ne connaissait qu’une seule plante et une seule source. Le miracle que ce type particulier de cannabis a représenté pour les familles de ces enfants a poussé le cannabis riche en CBD vers le grand public, comme l’illustre un documentaire de CNN réalisé par le Dr Sanjay Gupta. En conséquence, la demande de cannabis présentant ce rapport THC:CBD spécifique a grimpé en flèche.

Les profils cannabinoïdes de 14 variétés différentes de cannabis sont représentés sur cette page de tests de chromatographie sur couche mince.

Tout comme cette première souche 1:20 (connue sous le nom d’ACDC) a été isolée pour la première fois, une technique a été mise au point dans un laboratoire de cannabis indépendant en Californie sur la base de recherches préliminaires menées par Pacifico et al. en Italie, qui permettrait le développement et l’isolement rapides de ce type de cannabis rare et désormais important. Le programme a été développé à Pure Analytics pour analyser et interpréter les données sur les cannabinoïdes au stade végétatif afin de faciliter l’isolement rapide de la haute teneur en CBD, la caractérisation des ratios et l’optimisation de la puissance du CBD et du THC, ainsi que la prédiction des nombres absolus de puissance lorsque les plantes sont échantillonnées au bon stade de développement. Rien qu’au cours de la saison de croissance 2014, des centaines de phénotypes 1:20 THC:CBD ont été isolés pour être cultivés en plantes et mis à disposition sur le marché du cannabis médical. Cette technique, lorsqu’elle est exécutée correctement et que les données sont interprétées correctement, peut permettre aux agriculteurs d’avoir la boule de cristal dont ils ont toujours rêvé, de voir ce que les fleurs produiront avant qu’elles ne soient formées.

Une fois préparés et testés, les cercles d’échantillons sont mesurés à l’aide d’un outil de mesure d’étalonnage en plastique pour discerner les niveaux de cannabinoïdes.

Avec un test de cannabinoïdes au stade végétatif réalisé à l’aide du protocole exclusif développé par Pure Analytics Lab en Californie, un agriculteur peut identifier ses ratios THC:CBD au début du cycle de croissance, identifier les plantes ayant le potentiel d’accumulation de cannabinoïdes le plus élevé et obtenir une prédiction de la puissance de la fleur finale. L’agriculteur peut déterminer le ratio de cannabinoïdes chez les mâles et les femelles, et ces ratios resteront en place tout au long du processus de maturation et de floraison de la plante. En d’autres termes, un rapport de cannabinoïdes de 1:20 identifié dans une plante végétative âgée de deux semaines donnera des fleurs présentant le même rapport THC:CBD. Cette technique permet également d’identifier les semis ayant le plus grand potentiel d’accumulation de cannabinoïdes, ce qui permet à l’agriculteur d’identifier ses souches les plus puissantes avec les rapports THC:CBD souhaités alors qu’elles sont encore au stade végétatif. Il s’agit d’un progrès important qui permet le clonage des femelles et des mâles présentant les caractéristiques souhaitées au stade végétatif, afin de permettre la reproduction stratégique en masse de clones génétiquement identiques, créant ainsi une population de semences plus cohérente. Pour plus d’informations sur l’utilisation des tests au stade végétatif, visite le site www.pureanalytics.net/blog.

La variété‘Cannatonic × Sour Tsunami’,riche en CBD et à fort rendement, a été développée à l’aide de tests fournis par Pure Analytics.

Mesure la teneur en cannabinoïdes des plantes mâles avant qu’elles ne fleurissent. Choisis les mâles présentant les profils cannabinoïdes souhaités pour les programmes de sélection.

Tests de sécurité du cannabis – Pesticides, contaminants microbiologiques et autres

Si les tests sur les cannabinoïdes sont infiniment fascinants, d’autres types de tests sur le cannabis sont également significatifs pour la santé et le bien-être des patients qui consomment du cannabis dont ils n’ont pas contrôlé la production. De nombreux dispensaires de cannabis médical testent différents types de contaminants qui peuvent être nocifs pour les patients. Il s’agit notamment d’analyses de pesticides et d’analyses microbiologiques, ainsi que de tests pour les résidus chimiques tels que les solvants, les impuretés des solvants, les métaux lourds et les résidus de nutriments. Il existe de nombreuses façons différentes d’effectuer un type d’analyse donné. Par exemple, une analyse de pesticides peut être effectuée à l’aide de différents équipements.

Pour les pesticides, il est important qu’une analyse chromatographique soit effectuée à chaque fois et que l’analyse soit suffisamment sensible pour être significative. Il existe des « raccourcis » qu’il est tentant d’utiliser parce qu’ils sont moins chers et plus rapides, mais ils ne remplacent pas de manière adéquate une analyse chromatographique complète. Le problème des raccourcis tels que les tests immunologiques ou les tests généraux utilisant un spectromètre de masse pour la détection est qu’ils ne peuvent généralement pas atteindre une limite de détection qui soit vraiment significative par rapport à une contamination potentielle par les pesticides. Par exemple, si un contaminant peut présenter un risque pour la santé à 50 parties par milliard ou ug/kg, alors un dépistage de pesticides qui ne peut détecter la contamination qu’à des niveaux plus élevés tels que 100 parties par million ou mg/kg n’est pas significatif ou particulièrement utile.

Lorsque tu compares différentes approches de l’analyse des pesticides, tu dois tenir compte de quelques éléments clés :

  1. L’équipement utilisé.
  2. La sensibilité de la méthode, également appelée « limite de détection ».
  3. Composés analysés et rapportés.
  4. L’utilisation ou non de normes de référence certifiées par une tierce partie lors de l’identification d’un résultat positif.

Il est important de comprendre que tous les types d’équipement répertoriés ne peuvent pas détecter tous les pesticides susceptibles d’avoir été utilisés. Certains détecteurs sont très spécifiques et d’autres sont plus généraux. Il s’ensuit que plus le détecteur est généralisé, plus sa sensibilité à la contamination potentielle par les pesticides est réduite. Comme nous l’avons déjà mentionné, à moins d’être spécialement configuré, un spectromètre de masse n’est pas le meilleur choix pour la détection de la contamination par les pesticides en raison de son seuil de détection plus élevé, ce qui signifie qu’il ne peut probablement pas détecter une contamination à l’état de trace. L’utilisation de la détection par spectromètre de masse peut également entraîner de mauvaises habitudes dans le laboratoire. L’analyse des pesticides n’est ni triviale, ni bon marché. Pour être effectuée correctement, chaque classe de pesticides doit être analysée et évaluée séparément à l’aide du détecteur le plus sensible à cette classe de composés. Par exemple, les pesticides chlorés doivent toujours être confirmés par GC-ECD (chromatographie en phase gazeuse avec détection par capture d’électrons) et les herbicides phénoxyacides par HPLC-FD (chromatographie liquide à haute performance avec détection par fluorescence). Ils doivent également toujours être confirmés par rapport au matériel de référence certifié du pesticide. En d’autres termes, si la présence de myclobutanil est signalée, le myclobutanil acheté comme étalon de référence certifié par un tiers auprès d’une entreprise chimique devrait avoir été analysé en même temps que l’échantillon. Si cela n’a pas été fait, le résultat n’a pas été validé. Cela nous amène à expliquer comment l’utilisation des spectromètres de masse peut conduire à de mauvaises habitudes dans le laboratoire.

TYPES D’INSTRUMENTS ADAPTÉS À L’ANALYSE DES PESTICIDES

Acronyme de l’équipement
Description
GC-FIDchromatographie en phase gazeuse avec détection par ionisation de flamme
GC-ECDchromatographie en phase gazeuse avec détection par capture d’électrons
GC-MSchromatographie en phase gazeuse avec détection par spectromètre de masse
GC-PFPDchromatographie en phase gazeuse avec détection par photométrie de flamme pulsée
GC-NPDchromatographie en phase gazeuse avec détection de l’azote et du phosphore
HPLC o UPLC-UV-Vischromatographie liquide à haute ou ultra-haute performance avec détection photométrique UV-visuelle
HPLC o UPLC-MSchromatographie liquide à haute ou ultra-haute performance avec détection par spectromètre de masse
HPLC o UPLC-PDAchromatographie liquide à haute ou ultra-haute performance avec détection par réseau de photodiodes
HPLC o UPLC-FDchromatographie liquide à haute ou ultra-haute performance avec détection par fluorescence

Les spectromètres de masse sont des équipements étonnants qui ont l’immense capacité d’identifier les composés inconnus qui peuvent se trouver dans un mélange. Les spectromètres de masse sont équipés d’un accès, par le biais de leur logiciel, à une puissante base de données du NIST (National Institute of Standards and Technology) développée au fil des ans par des milliers de scientifiques qui ont soumis leurs données au NIST. Le logiciel permet d’effectuer une recherche dans la base de données par rapport à un point de données provenant d’une analyse par spectrométrie de masse. Le logiciel effectue une recherche dans la base de données et trouve la correspondance la plus proche avec une cote de probabilité indiquant qu’il s’agit d’un vrai résultat. Cette méthode est acceptable pour l’identification préliminaire d’un contaminant, mais elle ne permet pas d’affirmer que le composé est présent. Il doit être vérifié par rapport à la norme chimique certifiée pour le même composé afin d’être un résultat légitime identifiant un composé spécifique.

Voici quelques questions clés à poser à un prestataire de services lorsqu’on se renseigne sur son analyse des pesticides :

1. Quel type d’équipement utilises-tu pour effectuer une analyse de pesticides ?

  • Tu dois entendre « chromatographe » dans la réponse. Au minimum, tous les échantillons ont besoin d’un dépistage par chromatographie à partir d’un type d’équipement listé ici) . Note que tous les équipements n’ont pas la même sensibilité ou ne peuvent pas « voir » les mêmes composés...

2. Quels sont les composés que tu analyses ?

  • Ils devraient être en mesure de te fournir une liste des composés qu’ils peuvent détecter. Si un composé ne figure pas sur la liste, il ne sera pas « vu » dans l’analyse.
  • Si la réponse est « Nous testons tout », cela peut signifier qu’ils n’utilisent pas d’étalons de référence certifiés. C’est la réponse que donnent souvent les personnes qui effectuent un dépistage par spectrométrie de masse. Non seulement les normes de référence ne sont probablement pas utilisées, mais il est peu probable que la limite de détection soit significative.

3. Quelle est ta limite de détection ?

  • Tu veux entendre « des parties par milliard (ppb) à de faibles parties par million (ppm) » La détection peut varier en fonction du produit chimique dont il s’agit.
  • Cela peut aussi apparaître comme une gamme de μg/kg à une gamme basse de mg/kg.

Les analyses microbiologiques sont également utilisées pour dépister le cannabis médical. La majorité des prestataires de services dépistent la contamination par les moisissures et les champignons, tandis que d’autres dépistent également la contamination bactérienne, qui prend tout son sens par rapport aux produits destinés à être ingérés par voie orale. Les méthodes utilisées pour le dépistage de la contamination microbiologique comprennent la microscopie, l’analyse PCR (réaction en chaîne par polymérase), l’ensemencement et la culture avec des plaques qui peuvent indiquer des classes d’organismes, le dépistage des mycotoxines par TLC, et bien d’autres encore. Toutes ces méthodes, à l’exception de la microscopie, peuvent donner des résultats faussement positifs en raison d’une mauvaise manipulation ou d’une contamination croisée des échantillons.

Les analyses des métaux lourds sont généralement effectuées à l’aide d’un ICP-MS (spectromètre de masse à plasma inductif) et, si elles sont effectuées correctement selon des méthodes définies, elles offrent une analyse assez fiable. Les résidus de nutriments peuvent être analysés par diverses méthodes en fonction du type de contamination prévu. L’ICP-MS et la chromatographie ionique sont les deux approches les plus probables.

Gros plan sur la sécurité – La contamination par Aspergillus, pourquoi c’est important

Aspergillus est un genre qui comprend plus de quelques centaines d’espèces de moisissures. On le trouve dans la plupart des climats où pousse le cannabis. Certaines espèces d’Aspergillus peuvent provoquer des maladies graves chez les animaux, y compris les humains. Aspergillus fumigatus et A. flavus sont les plus problématiques car elles produisent de l’aflatoxine, une toxine et un agent cancérigène. Ces deux espèces peuvent contaminer le cannabis, y compris les produits comestibles. Les espèces A. fumigatus et A. clavatus provoquent souvent des maladies allergiques. D’autres espèces d’Aspergillus infectent fréquemment les cultures céréalières.

La culture de cannabis médical biologique est l’un des meilleurs moyens d’éviter les médicaments contaminés.

L’aspergillose pulmonaire est généralement causée par A. fumigatus, qui entraîne une infection des sinus paranasaux. Les symptômes comprennent la toux, les douleurs thoraciques, la fièvre et l’essoufflement ; ces symptômes courants rendent le diagnostic difficile. Les patients souffrant d’asthme, de mucoviscidose, de sinusite, du sida, d’un système immunitaire faible et de poumons affaiblis sont sensibles, tout comme les patients en chimiothérapie.

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