Medición de cannabinoides – Capitulo 2

Por Samantha Miller, Presidenta y Científica Jefe de Pure Analytics Cannabis Laboratory

Con el auge de los dispensarios de cannabis medicinal, han evolucionado otros tipos de empresas y proveedores de servicios para ayudar a cubrir sus necesidades, incluidos los laboratorios que analizan productos para la industria del cannabis medicinal. Antes de que existiera la legalización del cannabis medicinal, las pruebas de cannabis se limitaban a análisis realizados como parte de la investigación criminal o dentro de uno de los pocos programas de investigación, como el de la Universidad de Mississippi, supervisado por el Dr. Mahmoud ElSolhy, o, en Israel, el del Dr. Raphael Mechoulam, que realizan investigaciones sancionadas por el gobierno.

Hoy en día, el desarrollo y los avances de los laboratorios independientes de pruebas de cannabis en los estados con legalización del cannabis medicinal y recreativo representan un progreso emocionante tanto en la búsqueda de cannabis de grado médico cultivado y procesado según los estándares especificados.

También es emocionante la creación de una poderosa herramienta para que el cultivador independiente de cannabis impulse programas estratégicos de cultivo centrados en aislar rasgos de interés y aumentar la potencia de forma predictiva mediante pruebas en la fase vegetativa para ayudar a la selección de plantas para el cultivo o la cría. Véase «Las pruebas de potencia de cannabinoides como herramienta para el agricultor y el mejorador».

El Dr. Mechoulam da una conferencia en la Universidad Hebrea de Jerusalén

Los laboratorios especializados en el análisis del cannabis realizan varios tipos de pruebas para apoyar el modelo de dispensario médico, como pruebas de potencia de cannabinoides, análisis microbiológicos de mohos, hongos y bacterias, y pruebas de pesticidas que buscan residuos de sustancias químicas nocivas que puedan haberse aplicado durante el ciclo de crecimiento. A medida que los servicios de pruebas y el cannabis legalizado han proliferado y el mercado de productos ha evolucionado y cambiado rápidamente, también lo han hecho las ofertas de los laboratorios de cannabis. Muchos laboratorios ofrecen ahora pruebas para los compuestos de sabores y fragancias (conocidos como terpenos) que contiene el cannabis.

La gravitación hacia los concentrados extraídos químicamente, conocidos como cera, shatter, dabs y otros, también ha dado lugar a la demanda de servicios específicos, como las pruebas de disolventes residuales y las pruebas de impurezas tóxicas que se encuentran en el butano, el propano y el gas CO2 de baja calidad que suelen utilizarse para fabricar cera. En las regiones donde la regulación es más importante, también encontrará requisitos impuestos por el estado, como en Nevada, que obliga a realizar pruebas de metales pesados, fertilizantes residuales y nutrientes.

El dispensario de cannabis medicinal, Florin Wellness Center (FWC), está haciendo un negocio enérgico en esta foto tomada por Paul Clemons.

El primer laboratorio de cannabis de EE.UU. abrió sus puertas en Colorado. Muchos otros le siguieron rápidamente, la mayoría en California, donde el floreciente mercado de los dispensarios vio la proliferación de cientos de dispensarios en una sola ciudad, casi de la noche a la mañana. El tipo más común de pruebas realizadas por los laboratorios de cannabis son las pruebas de potencia de cannabinoides. Las pruebas de potencia proporcionan al cannabis medicinal a los pacientes información importante sobre los compuestos activos de su cannabis. Esto puede ayudarles a seleccionar el cannabis adecuado para ellos en función de su dolencia específica, indicándoles qué compuestos activos están presentes y sus cantidades relativas. Entre los cannabinoides que se suelen analizar se encuentran el THC, el THCA, el CBD, el CBDA, el CBN, el CBC y el CBG, y pronto se incluirán el THCV y el CBDV, gracias a los esfuerzos de las empresas de fabricación de productos químicos que apoyan las necesidades específicas del sector de las pruebas de cannabis.

Los laboratorios de cannabis estadounidenses están limitados en cuanto a los cannabinoides que pueden legítimamente incluir en sus análisis, dependiendo de qué cannabinoides estén disponibles para su compra como estándares de referencia certificados de las compañías de estándares químicos en los EE.UU.. En el momento de la publicación de este libro, los estándares de referencia de cannabinoides disponibles en EE.UU. para uso de los analistas incluyen: THC, THCA, CBD, CBDA, CBG, CBN, CBDV y CBC. Estos estándares de referencia son cannabinoides purificados en solución, y se utilizan para calibrar el equipo utilizado para medir la potencia. Estas soluciones de referencia certificadas son las que permiten al químico identificar y cuantificar los cannabinoides presentes en un extracto. Cuando el equipo se calibra adecuadamente utilizando estándares de referencia certificados, dos laboratorios diferentes deberían ser capaces de medir el mismo extracto de cannabis y proporcionar un resultado similar. Algunos laboratorios de cannabis deciden informar sobre los cannabinoides basándose en datos teóricos en lugar de en verificaciones de identidad y cantidad basada en el uso de un patrón químico de referencia certificado. Dicha práctica puede ser aceptable en una investigación de los pacientes, en el que los proveedores de servicios deben actuar con arreglo a las mismas normas «que los pacientes» si estuvieran regulados por el gobierno federal y sus análisis «certificados». Sin embargo, en un mercado saturado y altamente competitivo de proveedores de servicios, muchos «llegarán» a afirmar que pueden prestar servicios o realizar análisis de determinados compuestos, como cannabinoides exóticos y poco comunes, que otros no pueden, en un intento de desarrollar una ventaja competitiva en el mercado de las pruebas de cannabis. Si nadie más está analizando un determinado compuesto, es probable que haya una razón para ello, y la legitimidad del análisis puede ponerse en duda. Este nos lleva a la importancia de seleccionar un proveedor de servicios que pueda ofrecer resultados fiables y precisos.

Varios concentrados de cannabis (de izquierda a derecha): cera, shatter, bubble-hash y kief prensado (hachís).

Selección de un laboratorio de cannabis

Cuando los dispensarios, los pacientes y los cultivadores se disponen a elegir al proveedor de servicios más adecuado para ellos, puede parecerles que están vadeando una confusa letanía de opiniones, palabras de marketing y opciones. Tener a mano los datos sobre los procesos de análisis y los equipos relacionados con sus propias necesidades puede ayudarle a elegir el proveedor de servicios que mejor se adapte a sus necesidades.

Las pruebas de potencia de los cannabinoides han sido, con diferencia, las más controvertidas durante la infancia del cannabis independiente en los EE.UU.. Ha dado lugar a muchas pruebas ciegas de proveedores de servicios dentro de una región por parte de diversos grupos que buscan legitimar el proceso de pruebas o más bien exponer defectos en las prácticas de los servicios de pruebas de cannabis.
proveedores. Una de estas «pruebas de anillo» publicado en O’Shaughnessy’s journal of medical cannabis en 2011, fue realizado por California NORML e incluyó a los laboratorios de cannabis que ofrecían servicios en el estado de California en ese momento. Los resultados de 10 laboratorios fueron bastante reveladores y reforzaron el hecho de que el uso de materiales de referencia certificados es necesario para que los resultados de laboratorio a laboratorio estén en buena concordancia. Los resultados de los laboratorios que «fabricaban sus propios» patrones químicos de referencia en lugar de adquirir patrones certificados se desviaban significativamente de los del resto del grupo, mientras que la concordancia era buena visto en un puñado de laboratorios. La prueba sacó a la luz varios principios básicos que pueden actuar como guía para evaluar un laboratorio de cannabis. Comprender los procesos de prueba y equipos pueden ayudarle a elegir los proveedores de servicios y las opciones de pruebas que mejor se adapten a sus necesidades. Los distintos proveedores de servicios se especializan en diferentes tipos de muestras y ofrecen diferentes opciones analíticas en el entorno no regulado del cannabis.
En el momento de redactar este documento, no existe una forma específica de realizar un determinado tipo de análisis. Esto hace que se utilicen diversos métodos, lo que confunde al paciente y al agricultor a la hora de interpretar y comprender cómo comparar los resultados entre los distintos proveedores de servicios. Saber algunas cosas clave puede ayudar a orientarse en la dirección correcta.

Esta cosecha de cogollos de ‘Bubba Kush’ medía entre un 13 y un 19 por ciento de THC. Las muestras se tomaron en distintas partes de las plantas.

COMPARACIÓN ENTRE GC Y HPLC O UPLC

El proceso de prueba de potencia

Los pasos básicos del proceso de prueba de potencia que afectan a la exactitud y precisión de los resultados son:

1. muestreo
2. calibración de equipos
3. calidad de los patrones químicos de referencia utilizados
4. experiencia y conocimientos de la persona que realiza el trabajo

El muestreo puede realizarse en varias etapas del transporte del cannabis desde el agricultor hasta el paciente. En primer lugar, el producto puede muestrearse en la granja y entregarse a un dispensario que, a su vez, toma una muestra para enviarla al laboratorio, donde el propio laboratorio toma finalmente una muestra del cannabis. Cada paso del proceso, así como la manipulación de la muestra puede influir en los resultados finales de potencia y en la presencia de cannabinoides como el CBN (un producto de degradación). En cada punto en el que se manipula y se toma la muestra, la muestra de cannabis debe ser representativa de toda la cantidad de material de la que se ha seleccionado. Para el agricultor con varios kilos de la misma cepa de cannabis, tomar una muestra representativa significa hacer una selección de cogollos de varios tamaños de varias plantas y varias partes de la planta. El tamaño de muestra recomendado para enviar al laboratorio es de 0,25 a 1 gramo (0,008-0,035 oz) por libra de material.

En el laboratorio, la muestra debe trocearse o triturarse para homogeneizarla o uniformizarla. Una porción de esta muestra homogeneizada se pesa en balanzas muy sensibles y luego se extrae con disolventes como metanol o alcohol isopropílico para su análisis. Las balanzas utilizadas para pesar las muestras deben calibrarse con regularidad y debe llevarse un registro fechado de dichas calibraciones. En algunos laboratorios, las muestras se secan hasta alcanzar un contenido de humedad cero antes de pesarlas para el análisis. Dependiendo de la cantidad de humedad que tuviera el material vegetal al principio, esto puede afectar en gran medida a los resultados, entre un 3 y un 10 por ciento en peso. La extracción de la muestra implica colocar una cantidad medida de disolvente en un vial con la muestra de cannabis pesada. Diferentes laboratorios utilizan diferentes disolventes para su extracción. No todos los disolventes extraen bien todos los cannabinoides. El metanol, el etanol y el isopropanol son las mejores opciones para una extracción completa (también conocida como exhaustiva), mientras que la acetona y el hexano utilizados por algunos proveedores de servicios no extraen el THC y el CBD tan completamente. Esta extracción incompleta causaría una disminución general de los resultados de potencia. Tras añadir el disolvente, el proceso de extracción puede variar. Algunos pueden calentar la muestra para extraerla; otros pueden sonicar utilizando ondas ultrasónicas, o poner en un baño agitador o en una mesa. El uso de un baño de agua ultrasónico suele ser el mejor método para la extracción completa de cannabinoides. (Encontrará un estudio sobre estos problemas de extracción por solvente en https://www.restek.com/row).

Dependiendo del tipo de muestra que se analice, una forma de analizarla puede ser más apropiada que otra. La mayoría de las pruebas de potencia y pesticidas en muestras de cannabis implican el análisis de la muestra utilizando algún tipo de equipo de cromatografía. Dos tipos comunes son cromatografía de gases (GC) y cromatografía de líquidos de alto o ultra alto rendimiento (HPLC o UPLC). Estos instrumentos pueden estar equipados con distintos tipos de detectores. Algunos proveedores de servicios afirman ser superiores en función del equipo elegido. Ambos tipos de instrumentación arrojan resultados precisos y viables cuando se calibran correctamente y son utilizados por un operador experimentado que pueda interpretar y validar la salida de datos.

Cromatografía de gases (GC)

Un cromatógrafo de gases es un tipo de instrumentación analítica en la que una corriente a baja presión de gas comprimido -a menudo hidrógeno o helio- empuja una muestra del inyector a el detector del instrumento a través de un tubo de pequeño calibre conocido como columna. La columna de un cromatógrafo de gases es un tubo de sílice fundida de 15 a 30 metros de longitud recubierto con diversas sustancias en su interior. Estos recubrimientos y la longitud del tubo hacen que los compuestos se separen unos de otros en el espacio y en el tiempo a medida que se desplazan por la columna. De este modo, las muestras llegan al detector por separado y pueden medirse individualmente. Si un análisis no se realiza correctamente o se realiza con demasiada rapidez, dos compuestos pueden llegar al detector al mismo tiempo y medirse como un solo compuesto, lo que puede dar lugar a un resultado erróneo.

Los cromatógrafos de gases pueden estar equipados con varios tipos de detectores. Los tipos más comunes de detectores para la prueba de potencia del cannabis incluyen FID (detector de ionización de llama), MS (espectrómetros de masas) y TCD (detector de conductividad térmica). Los detectores FID y MS son las mejores opciones para un análisis fiable de cannabinoides por GC. El análisis de plaguicidas puede incluir detectores como el ECD (detector de captura de electrones), NPD (detector de nitrógeno-fósforo) o PFPD (detector fotométrico de llama pulsada).

En el caso de todos los tipos de detectores GC, el extracto de la muestra que se inyecta en el instrumento suele calentarse a temperaturas entre 302ºF y 392ºF (150°C-200°C). Para vaporizar la muestra de modo que pueda ser trasladada del inyector a la columna por la corriente de gas, la muestra también se combustiona cuando llega a un detector FID. Esta vaporización de la muestra descarboxilará o activará cualquier cannabinoide ácido como si hubiera sido quemado o vaporizado. En el detector de un espectrómetro de masas, la muestra se ioniza y fragmenta para identificar los compuestos presentes. La vaporización de la muestra hace que la cromatografía de gases sea la mejor opción para el análisis de muestras de cannabis destinadas a la inhalación por combustión o vaporización. Desde una perspectiva analítica, esta medición directa de los cannabinoides en su estado descarboxilado es la que mejor imita la experiencia del paciente tras la inhalación.

Recorrido de la muestra en un cromatógrafo de gases.

Cromatógrafo de gases automuestreador.

Cromatógrafo de líquidos de alto rendimiento. (Los cromatógrafos líquidos de alto rendimiento tienen el mismo aspecto).

Cromatografía líquida de alto y ultra alto rendimiento (HPLC y UPLC)

La cromatografía líquida de alto y ultra alto rendimiento se conoce comúnmente como HPLC y UPLC. La diferencia entre HPLC y UPLC es la presión máxima que puede soportar el instrumento. Los instrumentos de UPLC pueden analizar más rápido y mantener la precisión en la mayoría de los casos en comparación con los de HPLC. En la HPLC y la UPLC, una corriente de disolvente a alta presión ayuda a mover los compuestos desde el inyector hasta el detector. Al igual que con la GC, hay varios tipos de detectores que se utilizan habitualmente para el análisis de cannabinoides. Los detectores UV-Vis (espectroscopia ultravioleta visible) utilizan longitudes de onda de la luz que pasa a través de la muestra para medir lo que hay en ella. Los detectores de fluorescencia y de matriz de fotodiodos (PDA) utilizan determinadas longitudes de onda de luz para excitar compuestos en el detector, que luego se miden a medida que emiten fotones de la luz retrocediendo a un estado menos energético. Los HPLC y los UPLC también pueden ser equipados con detectores MS. Se trata, por lo general, de un segundo detector en línea tras los detectores PDA o UV-Vis. La medición de cannabinoides en un sistema HPLC o UPLC puede llevarse a cabo sin vaporizar la muestra mediante calor. Como resultado, el análisis por HPLC o UPLC imita mejor el modo de uso de las muestras comestibles o ingeribles. Al no calentar la muestra durante su preparación o análisis, se puede obtener diferente información sobre cannabinoides para comprender las propiedades de la muestra como forma ingerible de cannabis. Es importante entender si los cannabinoides se encuentran en su forma ácida o descarboxilada a efectos de ingerir cannabis para usos terapéuticos o recreativos. El THC-ácido y el CBD-ácido tienen propiedades psicoactivas y terapéuticas muy diferentes en comparación con el THC y el CBD descarboxilados. Por ejemplo, el THC-ácido no es tóxico, mientras que el THC calentado es muy tóxico cuando se ingiere oralmente en cantidades muy pequeñas. Por ejemplo, una dosis oral de THC es de 15 mg. Es importante analizar las muestras ingeridas por vía oral mediante HPLC si no está seguro de si o no los cannabinoides están descarboxilados y necesitan verificar el contenido de un preparado ingerible. Muchos productores de preparados de cannabis ingeribles no entienden claramente las condiciones para la conversión completa de los ácidos cannabinoides en THC y CBD, lo que da lugar a muchos casos de comestibles y tinturas parcialmente descarboxilados. En algunos casos, es importante verificar que NO se ha producido descarboxilación para aquellos pacientes que deseen utilizar una terapia con ácidos cannabinoides evitando específicamente las formas descarboxiladas.

Una de las razones por las que es importante restringir el uso de HPLC y UPLC a muestras específicas en las que sea necesario es la gran cantidad de residuos peligrosos tóxicos para el medio ambiente que se producen como resultado de la realización de análisis por HPLC. Como se ha descrito anteriormente, se utiliza una corriente de disolvente a presión para mover el analito del inyector al detector. Esta corriente de disolvente suele ser una mezcla de acetonitrilo y alcohol isopropílico. Su destino es la botella de residuos peligrosos, por lo que deben evitarse los análisis innecesarios por HPLC en un esfuerzo por tener un bajo impacto medioambiental, y restringir el uso de este método a muestras ingeribles en las que realmente sea necesario.
Algunos ejemplos de muestras ingeribles incluyen tinturas, zumos de cannabis, comestibles y cápsulas.

Comestibles de cannabis.

Cogollos de cannabis diferentes tienen perfiles cannabinoides distintos.

Comparación de los resultados de las pruebas – HPLC frente a GC

Una segunda razón por la que el HPLC y el UPLC no deberían utilizarse en muestras destinadas a la inhalación es que los resultados no se expresan en la forma en la que se consumirán los cannabinoides cuando se calienten e inhalen, las formas descarboxiladas THC y CBD, y pueden dar la percepción de una potencia superior a la que contiene el cannabis. Para los pacientes que siguen un régimen de dosificación específico, es importante poder calcular con precisión el THC y el CBD consumidos. Los resultados de los análisis HPLC y UPLC mostrarán THCA, THC, CBDA y CBD, además de otros cannabinoides como CBN y CBG. Muchos laboratorios que utilizan HPLC/UPLC para el análisis de cannabinoides de las flores expresan sus resultados finales como THC=THCA + THC en una muestra. Esto puede confundir al consumidor porque el valor de THCA no se convierte matemáticamente a su cantidad equivalente de THC descarboxilado. El THC es la forma que experimentará el consumidor cuando se fume o vaporice, por lo que la medida de potencia para el cannabis destinado a la inhalación debería ser en la forma neutra o THC en lugar de THCA.

Expresar los resultados como THC+THCA puede provocar la expresión de resultados «THC» superiores a los que el usuario experimentará con fumar o vaporizar debido a las siguientes consideraciones: El THCA y el CBDA son moléculas más pesadas que el THC y el CBD. Para expresar el THC descarboxilado total que puede contener una muestra, primero debe ajustar el valor de THCA multiplicando THCA o CBDA por un factor de 0,88 para tener en cuenta esta diferencia de peso molecular. Comprender las conversiones de la figura siguiente puede ayudarle a comparar los resultados generados por HPLC/UPLC y GC. También debes tener en cuenta si los resultados se expresan en peso seco. Debes saber cómo calcula e informa los resultados el laboratorio que estás utilizando para saber si tienes que realizar alguna de las conversiones que se indican a continuación para que los resultados sean significativos para la forma en que utilizarás el cannabis.

Para convertir el THCA en THC:

• Multiplicar el valor THCA por 0,88%.
• Ejemplo: 21% THCA × 0,88 = 18,5% THC.

Para convertir el THC en THCA:

• Multiplicar el valor THCA por 1,14.
• Ejemplo: 17% THC × 1,14 = 19,4% THCA.

Lo mismo ocurre con la CBDA y la CBD

Como puedes ver, dependiendo de tu tipo de muestra (flor, concentrado, comestible o tintura), un tipo de equipo puede proporcionar resultados más significativos, dependiendo de tu uso del cannabis.

• Las muestras de cannabis para inhalación, como flores y concentrados para fumar o vaporizar, deben analizarse por GC.
• El cannabis para ingestión oral debe analizarse por HPLC o UPLC si se desconoce el estado de descarboxilación o sin verificar.
• Al evaluar los resultados de las pruebas, debe saber si se expresan en términos de:
  • Formas ácidas o descarboxiladas.
  • Peso seco o humedad total.

Muchos pacientes y agricultores se preguntan qué resultados son típicos y cómo varía la información según la cepa:

Métodos alternativos de prueba de potencia: Cromatografía en capa fina (TLC)

Las pruebas de cromatografía en capa fina miden el perfil cannabinoide de hasta 6 cannabinoides: THC, THCV, CBD, CBN, CBG, CBC, y sus ácidos correspondientes. Las pruebas cuestan unos 10 USD cada una y requieren cierta práctica para realizarlas con precisión. La muestra se prepara y se mezcla con un disolvente. Un tinte selectivo detecta los niveles de cannabinoides y los muestra en papel secante. A continuación, se interpretan los resultados y se comparan con una tabla. Cada cannabinoide reacciona de forma diferente con el colorante, lo que da lugar a colores distintivos. Consulte https://www.alpha-cat.org para mas información sobre la cromatografía en capa fina.

Un segmento de proveedores de servicios presenta los resultados de la cromatografía en capa fina (TLC) en lo que se suele denominar «tiras reactivas». En algunos casos, estas tiras reactivas se promocionan como capaces de proporcionar resultados precisos sobre la potencia del cannabis. En general, sin un equipo especializado, las tiras reactivas sólo sirven para saber si hay o no ciertos cannabinoides, pero no para saber cuánto hay (es decir, la potencia).

Cómo pueden utilizar los pacientes los resultados de potencia

A menudo, los pacientes se enfrentan a un mareante abanico de opciones en un dispensario de cannabis medicinal. Disponer de información precisa sobre la potencia de los cannabinoides puede ayudar a los pacientes a seleccionar el mejor cannabis medicinal para su dolencia o afección. Conocer un poco sobre los diferentes efectos y aplicaciones médicas de varios cannabinoides puede ayudar al paciente a tener una experiencia exitosa y eficaz. El THC es el principal ingrediente activo del cannabis, responsable de algunos de los efectos embriagadores del cannabis.

Resultados típicos de THC en flores de cannabis

• De leve a muy fuerte
• Media: 16,5 por ciento

Resultados típicos del CBD en las flores de cannabis
A menudo no se encuentra en cantidades significativas
Siempre acompañado de THC Rico en CBD: >4% de CBD en peso

Los dispensarios de cannabis medicinal, como el Abatin Wellness Center de Sacramento (California), están bien surtidos.

El THC se utiliza a menudo para tratar el dolor, las náuseas, el insomnio y la pérdida de apetito, entre otras muchas dolencias. El CBD es el segundo cannabinoide más predominante y se considera un ingrediente no tóxico del cannabis, aunque cuando se consume tiene claros efectos que alteran el estado de ánimo de la mayoría. El CBD alivia los espasmos musculares, las convulsiones y la ansiedad, tiene actividad antibacteriana y antitumoral y prolonga los efectos del THC. El CBN es el producto de degradación del THC. La presencia de CBN puede indicar que un producto es antiguo o no se ha almacenado correctamente. El CBN se forma cuando el THC se expone a la luz ultravioleta y al oxígeno con el paso del tiempo. El CBN tiene algunas propiedades terapéuticas y se ha demostrado que reduce el ritmo cardíaco y las convulsiones. Los pacientes han informado de que los ácidos cannabinoides como el THCA y el CBDA alivian los síntomas de espasticidad y convulsiones.

Probar el perfil cannabinoide de las plantas vegetativas para ver si son candidatas a un
programa de cría.

Las pruebas de potencia de los cannabinoides como herramienta para el agricultor y el ganadero

A medida que aumenta el número de consumidores de cannabis medicinal, crece también la demanda de opciones con proporciones específicas de THC:CBD. Del mismo modo, la creciente demanda para el cannabis con los niveles más altos de potencia, ya que la potencia se traduce fácilmente en la cantidad de compuestos activos y el valor del can- bis en el mercado actual. La demanda de cannabis con proporciones específicas de THC:CBD suele estar impulsada por una población con una dolencia específica o enfermedad. Un ejemplo que está cobrando notoriedad en estos momentos se refiere a las necesidades específicas de los niños con un tipo de epilepsia conocido como como el síndrome de Dravet. No son infrecuentes los casos de 400 a 800 convulsiones diarias en estos niños, que también padecen problemas de desarrollo, cognitivos y emocionales.
La desesperación lleva a los padres de estos niños a experimentar con extractos de cannabis como tratamiento para su enfermedad. El tipo de cannabis que necesitan estos niños para reducir sus convulsiones es casi totalmente CBD con muy poco THC. La proporción preferida de THC:CBD para la mayoría de los niños con Dravet que se medican con cannabis es de 1:20 o superior. Este tipo de cannabis se aisló e identificó por primera vez hace tan sólo 4 años antes de la publicación de este libro. En aquel momento sólo se conocía una planta y una fuente. El milagro que este tipo particular de cannabis representó para las familias de estos niños ha empujado al cannabis rico en CBD hacia la corriente principal, como se ilustra en un documental de la CNN por el Dr. Sanjay Gupta. Como resultado, la demanda de cannabis con esta proporción específica de THC:CBD se disparó.

Los perfiles cannabinoides de 14 variedades de cannabis están representadas en esta página de pruebas de cromatografía en capa fina.

Justo cuando se aisló por primera vez esa primera cepa 1:20 (conocida como ACDC), en un laboratorio de cannabis independiente de California se desarrolló una técnica basada en las investigaciones preliminares realizadas por Pacifico et al. en Italia, que permitiría el rápido desarrollo y aislamiento de este raro y ahora importante tipo de cannabis. El programa se desarrolló en Pure Analytics para analizar e interpretar los datos de cannabinoides en fase vegetativa con el fin de facilitar el aislamiento rápido de alto CBD, la caracterización de la proporción y la optimización de la potencia de CBD y THC, así como la predicción de los números absolutos de potencia cuando las plantas se muestrean en la fase correcta de desarrollo. Solo en la temporada de cultivo de 2014, se aislaron cientos de fenotipos 1:20 THC:CBD que se cultivarían en plantas y estarían disponibles en el mercado del cannabis medicinal. Esta técnica, cuando se realiza adecuadamente y los datos se interpretan correctamente, puede permitir a los agricultores tener la bola de cristal que siempre quisieron, para ver lo que producirán las flores antes de que se formen.

Una vez preparados y analizados, los círculos de muestra se miden con una herramienta de medición de calibración de plástico para discernir los niveles de cannabinoides.

Con una prueba de cannabinoides en fase vegetativa realizada mediante el protocolo patentado desarrollado por Pure Analytics Lab en California, un agricultor puede identificar sus proporciones de THC:CBD al principio del ciclo de crecimiento, identificar las plantas con el mayor potencial de acumulación de cannabinoides y obtener una predicción de la potencia final de la flor. El agricultor puede determinar la proporción de cannabinoides tanto en machos como en hembras, y estas proporciones se mantendrán durante todo el proceso de maduración y floración de la planta. Es decir, una proporción de cannabinoides de 1:20 identificada en una planta vegetativa de dos semanas dará lugar a flores con la misma proporción de THC:CBD. Esta técnica también permite la identificación de las plántulas con el mayor potencial de acumulación de cannabinoides, lo que permite al agricultor identificar sus cepas más potentes con las proporciones THC:CBD deseadas mientras aún están en fase vegetativa. Se trata de un poderoso avance que permite la clonación de hembras y machos con los rasgos deseados en la fase vegetativa para posibilitar la cría estratégica en masa de clones genéticamente idénticos, creando así una población de semillas resultante más consistente. Para más información sobre el uso de las pruebas de estado vegetativo, visite www.pureana- lytics.net/blog.

La ‘Cannatonic × Sour Tsunami’, rica en CBD y de alto rendimiento, se desarrolló mediante pruebas
proporcionado por Pure Analytics.

Medir el contenido de cannabinoides de las plantas macho antes de que florezcan. Elige machos con perfiles de cannabinoides deseables para los programas de cría.

Pruebas de seguridad del cannabis: plaguicidas, contaminantes microbiológicos y de otro tipo

Mientras que las pruebas de cannabinoides son infinitamente fascinantes, otros tipos de pruebas de cannabis también son significativas para la salud y el bienestar de los pacientes que consumen cannabis cuya producción no han controlado. Muchos dispensarios de cannabis medicinal realizan pruebas de varios tipos de contaminantes que pueden ser perjudiciales para los pacientes. Entre ellos se incluyen el análisis de pesticidas y el análisis microbiológico, así como pruebas de residuos químicos como disolventes, impurezas de disolventes, metales pesados y residuos de nutrientes. Hay muchas formas diferentes de realizar un determinado tipo de análisis. Por ejemplo, un análisis de plaguicidas puede realizarse con distintos equipos.

Para los plaguicidas es importante que se realice siempre un análisis cromatográfico y que éste sea lo suficientemente sensible para tener sentido. Hay «atajos» que resulta tentador utilizar porque son más baratos y más rápidos, pero no son un sustituto adecuado de un análisis cromatográfico completo. El problema de los métodos abreviados, como los cribados por inmunoensayo o los cribados generales que utilizan un espectrómetro de masas para la detección, es que generalmente no pueden alcanzar un límite de detección realmente significativo en relación con la posible contaminación por plaguicidas. Por ejemplo, si un contaminante puede suponer un riesgo para la salud a 50 partes por billón o ug/kg, entonces un cribado de pesticidas que sólo puede detectar la contaminación a niveles más altos, como 100 partes por millón o mg/kg, no es significativo ni particularmente útil.

A la hora de comparar distintos métodos de análisis de plaguicidas, hay que tener en cuenta algunos aspectos clave:

5. Equipo utilizado
6. Sensibilidad del método, también denominada «límite de detección».
7. Compuestos analizados y notificados
8. Si se utilizan normas de referencia certificadas por terceros para identificar un resultado positivo.

Es importante tener en cuenta que no todos los equipos de la lista pueden detectar todos los plaguicidas que se hayan utilizado. Algunos detectores son muy específicos y otros son más genéricos. De ello se deduce que cuanto más generalizado sea el detector, más reducida será su sensibilidad a una posible contaminación por plaguicidas. Como se ha señalado anteriormente, a menos que esté especialmente configurado, un espectrómetro de masas no es la mejor opción para la detección de contaminación por plaguicidas debido a su umbral de detección más alto, lo que significa que probablemente no pueda ver la contaminación a nivel de trazas. El uso de la detección por espectrómetro de masas también puede dar lugar a malos hábitos en el laboratorio. El análisis de plaguicidas no es trivial ni barato. Para hacerlo correctamente, cada clase de plaguicida debe analizarse y evaluarse por separado utilizando el detector más sensible a esa clase de compuestos. Por ejemplo, los plaguicidas clorados deben confirmarse siempre mediante espectrómetros puede conducir a malos hábitos en el laboratorio.

TIPOS DE INSTRUMENTOS ADECUADOS PARA EL ANÁLISIS DE PLAGUICIDAS

Los espectrómetros de masas son equipos asombrosos con una inmensa capacidad para identificar compuestos desconocidos que puedan estar en una mezcla. Los espectrómetros de masas están equipados con acceso a través de su software a una potente base de datos del NIST (Instituto Nacional de Normas y Tecnología) desarrollada a lo largo de los años por miles de científicos que han enviado sus datos al NIST. Permite realizar una búsqueda en la base de datos en relación con un punto de datos de un análisis de espectrometría de masas.
El software busca en la base de datos y encuentra la coincidencia más cercana con un índice de probabilidad de que sea un resultado verdadero. Esto es aceptable para una identificación preliminar de un contaminante, pero no es una base para informar de que el compuesto está presente. Debe verificarse con el estándar químico certificado para el mismo compuesto a fin de que sea un resultado legítimo que identifique un compuesto específico.

Estas son algunas de las preguntas clave que hay que hacer a un proveedor de servicios a la hora de informarse sobre su análisis de pesticidas:

1. ¿Qué tipo de equipo utiliza para realizar un análisis de plaguicidas?

• Quiere oír «cromatógrafo» en la respuesta. Como mínimo, todas las muestras necesitan una criba cromatográfica de uno de los tipos de equipos enumerados en «Cromatografía de gases (GC)«.

2. ¿Qué compuestos analiza?

• Deberían poder facilitarle una lista de los compuestos que pueden detectar. Si uncompuesto no está en su lista, no lo «verán» en el análisis.
• Si la respuesta es: «Hacemos pruebas para todo», puede significar que no están utilizando patrones de referencia certificados. Esta es la respuesta que suelen dar quienes realizan un cribado por espectrometría de masas. No sólo es probable que no se utilicen patrones de referencia, sino que es poco probable que el límite de detección sea significativo.

3. ¿Cuál es su límite de detección?

• Quiere oír «rango de partes por billón (ppb) a bajo rango de partes por millón (ppm)». La detección puede variar en función de la sustancia química de que se trate.
• Esto también puede aparecer como rango de μg/kg a bajo rango de mg/kg.

Los análisis microbiológicos también se utilizan para analizar el cannabis medicinal. La mayoría de los proveedores de servicios analizan la contaminación por moho y hongos, mientras que otros también analizan la contaminación bacteriana, que adquiere mayor importancia en relación con los productos destinados a la ingestión oral. Los métodos utilizados para detectar la contaminación microbiológica incluyen microscopía, análisis PCR (reacción en cadena de la polimerasa), siembra en placas y cultivo con placas que pueden indicar clases de organismos, detección de micotoxinas mediante TLC, y más. Todos estos métodos, excepto la microscopía, pueden dar falsos positivos debido a una manipulación incorrecta o a la contaminación cruzada de las muestras.

Los análisis de metales pesados suelen realizarse con un ICP-MS (espectrómetro de masas de plasma de acoplamiento inductivo) y, si se hacen siguiendo métodos definidos, ofrecen un análisis bastante fiable. Los residuos de nutrientes pueden analizarse mediante diversos métodos en función del tipo de contaminación que se prevea. El ICP-MS y la cromatografía iónica serían los dos métodos más probables.

Enfoque en la seguridad – Contaminación por Aspergillus, por qué es importante

Aspergillus es un género que consta de más de unos cientos de especies de moho. Se encuentra en la mayoría de los climas en los que crece el cannabis. Algunas especies de Aspergillus pueden causar enfermedades graves en los animales incluidos los humanos. Aspergillus fumigatus y A. flavus son las más problemáticas porque producen aflatoxina, una toxina y carcinógeno. Ambas especies pueden contaminar el cannabis, incluido el comestible. A. fumigatus y las especies de A. clavatus suelen causar enfermedades alérgicas. Otras especies de Aspergillus infectan con frecuencia los cultivos de cereales.

Cultivar cannabis medicinal orgánico es una de las mejores maneras de evitar medicamentos contaminados.

La aspergilosis pulmonar suele estar causada por A. fumigatus, que provoca una infección de los senos paranasales. Los síntomas incluyen tos, dolor torácico, fiebre y disnea; estos síntomas comunes dificultan el diagnóstico. Los pacientes con asma, fibrosis quística, sinusitis, SIDA, sistemas inmunitarios débiles y pulmones débiles son susceptibles, al igual que los pacientes de quimioterapia.